[發(fā)明專利]抑制酪蛋白激酶2活性在促進(jìn)I型干擾素表達(dá)的應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510617485.3
• 申請(qǐng)日: 2015-09-24
• 公開（公告）號(hào): CN105457029A
• 公開（公告）日: 2016-04-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 肖暉;杜旻;劉晶華;謝亞棟;鐘勁;向禹
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院上海巴斯德研究所
• 主分類號(hào): A61K45/00
• 分類號(hào): A61K45/00;A61K48/00;A61K31/7088;A61K39/395;A61P31/12;A61P35/00;A61P25/28;A61P37/02;G01N33/68;C07K14/56;A61K31/4192;A61K31/4184;A61K31/3
• 代理公司: 上海一平知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31266
• 代理人: 劉妍珺;陳詳

1.酪蛋白激酶2(Caseinkinase2，CK2)抑制劑的用途，其特征在于，(i)用于制備促進(jìn)I型干擾素(I-IFN)和/或I型干擾素誘導(dǎo)基因或其蛋白表達(dá)的藥物組合物；和/或(ii)用于制備治療和/或預(yù)防I型干擾素缺乏相關(guān)疾病的藥物組合物。

2.如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，所述的抑制劑包括CK2的反義核酸、抑制性microRNA、抗體或小分子化合物。

3.如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，所述的I型干擾素缺乏相關(guān)疾病包括：病毒感染性疾病、惡性腫瘤、多發(fā)性硬化(MultipleSclerosis)。

4.如權(quán)利要求3所述的用途，其特征在于，所述的病毒感染性疾病包括感染了以下的病毒的疾病：?jiǎn)渭儼捳畈《?HSV)、水泡病毒(VSV)、卡波希氏瘤皰疹病毒(KSHV)、呼吸道合胞病毒(RSV)、手足口病病毒(腸道病毒EV71和CA16)、乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、或人類獲得性免疫缺陷病毒/艾滋病病毒(HIV)；和/或

所述的惡性腫瘤包括以下腫瘤：多毛細(xì)胞白血病(hairycellleukaemia)、慢性髓性白血病(CML)、淋巴瘤(lymphoma)、骨髓瘤(myeloma)、黑色素瘤(melanoma)、腎細(xì)胞癌(renalcellcarcinoma)、膀胱癌(bladdercellcarcinoma)、或卡波希氏肉瘤(Kaposi’ssarcoma)。

5.如權(quán)利要求2所述的用途，其特征在于，所述的抑制劑為抑制I型干擾素表達(dá)和/或活性的小分子化合物，較佳地，包括四溴苯三唑(TBB)、CX-4945(Silmitasertib)、DMAT(2-二甲氨基-4,5,6,7-四溴-1H-苯并咪唑)、山奈酚、酪氨酸磷酸化抑制劑AG114(TyrphostinAG114)、四溴肉桂酸、3-[[5-(4-甲苯基)噻吩[2,3-d]嘧啶-4-yl]硫基]丙酸(TTP22)、CX-5011、鞣花酸(EllagicAcid)、3-甲基-1,6,8-三氫蒽醌(emodin)、4',5,7-三羥基黃酮(apigenin)。

6.如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，所述的I型干擾素誘導(dǎo)基因或其蛋白包括CXCL10/IP-10、STAT1、MX1、MX2、Rsad2/Viperine、磷酸激酶TBK1、干擾素調(diào)節(jié)因子3(IRF3)。

7.一種體外非治療性的促進(jìn)細(xì)胞表達(dá)I型干擾素和/或I型干擾素誘導(dǎo)基因或其蛋白和/或體外非治療性的抑制I型干擾素缺乏相關(guān)病毒細(xì)胞和/或腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的方法，其特征在于，包括步驟：在CK2抑制劑的存在下，培養(yǎng)細(xì)胞，從而促進(jìn)細(xì)胞表達(dá)I型干擾素和/或I型干擾素誘導(dǎo)基因或其蛋白和/或抑制I型干擾素缺乏相關(guān)病毒細(xì)胞和/或腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)。

8.一種篩選能夠抑制CK2的化合物的方法，其特征在于，包括步驟：

(a1)在試驗(yàn)組中，向細(xì)胞培養(yǎng)體系加入待測(cè)化合物，并測(cè)定I型干擾素的表達(dá)量和/或活性；在對(duì)照組中，向細(xì)胞培養(yǎng)體系不加入待測(cè)化合物，并測(cè)定I型干擾素的表達(dá)量和/或活性；

其中，若試驗(yàn)組中I型干擾素的表達(dá)量和/或活性顯著高于對(duì)照組，則說明所述的候選化合物為能夠抑制CK2的化合物；和/或

(a2)在試驗(yàn)組中，向病毒感染的細(xì)胞培養(yǎng)體系中加入待測(cè)化合物，并測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)體系中病毒的滴度；在對(duì)照組中，向病毒感染的細(xì)胞培養(yǎng)體系中加入待測(cè)化合物，并測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)體系中的病毒滴度；

其中，若試驗(yàn)組病毒的滴度顯著低于對(duì)照組，則說明所述的候選化合物為能夠抑制CK2的化合物。

9.如權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，還包括步驟：

(b)對(duì)(a)中的化合物進(jìn)一步測(cè)試其對(duì)酪蛋白激酶2基因或其蛋白的促進(jìn)作用。

10.一種制備I型干擾素的方法，其特征在于，包括步驟：

(i)在CK2抑制劑的存在下培養(yǎng)細(xì)胞；

(ii)收集、分離并純化細(xì)胞培養(yǎng)液中的I型干擾素。