[發明專利]一種可同時評價補血類中藥復方制劑四種原藥材質量的方法

有效

• 申請號: 201510613662.0
• 申請日: 2015-09-23
• 公開（公告）號: CN105158397B
• 公開（公告）日: 2018-01-16
• 發明（設計）人: 張淹;趙婷婷;周祥山;王春艷;李士棟;張路;彭照琪;孫陽恩
• 申請（專利權）人: 東阿阿膠股份有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/06
• 代理公司: 北京科龍寰宇知識產權代理有限責任公司11139
• 代理人: 孫皓晨

技術領域

本發明涉及一種中藥材的質量評價方法，尤其涉及一種評價補血類中藥復方制劑中四種原藥材質量的方法。

背景技術

復方阿膠漿是由東阿阿膠股份有限公司生產的一種補益氣血的復方中藥口服液，其配方由阿膠、熟地黃、黨參、山楂、紅參五味中藥材組成。目前，原藥材的質量標準檢測項需對五味藥材中的各藥效成分含量單獨測定，需對每味藥材分別處理、單獨進樣檢測，且目前建立的成分測定指標不能全面反映藥材質量。本發明通過建立原藥材的前處理及HPLC-MS檢測方法，統一了多味藥材的前處理及檢測方法，避免了多味藥材分別前處理、單獨檢測的繁瑣過程，用時更短，且檢測指標更加全面，更能多維度反映藥材的質量，建立了原藥材的質量綜合評價體系。

目前在將藥典質量標準及文獻中改進的熟地黃、黨參、山楂、紅參的質量評價方法應用于復方阿膠漿的原藥材藥效成分含量檢測時，存在以下問題：

四味中藥材中的成分需用不同的試劑單獨提取，方法繁瑣、提取時間長且各藥材成分分析方法的液相條件不一致；

藥典中對于山楂的成分檢測為枸椽酸單一成分，紅參的藥效成分檢測為Rg1、Re、Rb1三種成分，不能較全面地反應此兩種藥材的質量。

發明內容

本發明要解決的技術問題是彌補目前分析方法的不足，提供一種能對四種藥材一次處理、一次進樣同時檢測四種藥材中枸椽酸、毛蕊花糖苷等九種藥效成分的方法，且藥材前處理方式采用超聲法，較之前的前處理方法更簡單、用時更短，可全面、準確地評價四種藥材的質量。

HPLC-MS技術可根據不同類型化合物的裂解規律，快速、靈敏、高通量地測定中藥化學成分含量，因此被廣泛應用于中藥化學成分研究。為了保證高效地實現對四種藥材采用同一處理方法，對九種化合物采用一次進樣同時定量，本發明通過對四種藥材的前處理條件、色譜條件、質譜參數、流動相組成、流動相洗脫梯度、流速等進行了摸索，在對四種藥材的前處理條件進行摸索的過程中，由于其成分復雜，并且考慮最大程度地提取藥材中的藥效成分，采取了藥材煎煮、回流、超聲等方法，最終得到了最佳的藥材前處理方法，發現甲醇的濃度選擇、超聲次數的篩選是關鍵點。通過本方法的成功建立，為復方制劑多種原藥材的整體質量評價提供了一種新的研究思路。

本發明提供的質量檢測方法能同時檢測并定量分析熟地黃、黨參、山楂、紅參中的九種成分，且藥材前處理方法簡單、可操作性強，能夠高效、準確地評價藥材的質量，為指導復方制劑的生產、構建原料評價體系有重要意義。

根據以上思路，本發明所提供的原藥材的質量檢測方法是采用高效液相色譜-串聯三重四級桿質譜對樣品進行分析，樣品經超聲處理后取上清，稀釋后用外標法進樣分析。

為達上述目的，本發明一種可同時評價補血類中藥復方制劑四種原藥材質量的方法，包括以下步驟：

(1)、供試品的制備

精密稱取過篩的黨參粉末2g，置于錐形瓶中；

將熟地黃切片，置于烘箱內烘干、粉碎，過篩，準確稱取熟地黃粉末5g、山楂粉末2g、紅參粉末5g置于上述同一錐形瓶中，加入50-120ml的70％—90％甲醇超聲1-4次，每次0.2-1小時，濾過后合并濾液，用甲醇將濾液稀釋20倍，作為供試品溶液。

(2)、HPLC-MS檢測

采用C18色譜柱；流動相：A:0.02％甲酸水-B:0.02％甲酸乙腈(含0.02％甲酸的水和含0.02％甲酸的乙腈)，梯度洗脫，流速為0.2-0.6ml/min，柱溫為30℃；進樣量20ul；分析時間60分鐘；然后樣品進入質譜儀檢測。

其中步驟(1)中所述黨參過四號篩，所述熟地黃切片厚度為0.5cm，并置于60℃烘箱內烘干半小時后粉碎，過40目篩。

其中步驟(1)中藥材樣品前處理方法為準確稱取黨參粉末2g、熟地黃粉末5g、山楂粉末2g、紅參粉末5g置于錐形瓶中，加入甲醇的濃度75％、體積為100ml。

其中步驟(1)中甲醇超聲次數為2次，每次0.5h。

其中步驟(2)中梯度洗脫程序為：0分鐘流動相A：B的比例為75:25；15分鐘流動相A：B的比例為68:32；25分鐘流動相A：B的比例為63:37；45分鐘流動相A：B的比例為22:78；60分鐘流動相A：B的比例為75:25。流速為0.5ml/min。