[發明專利]基于光點擊反應且具有熒光響應的DNA標記物及制備方法與應用有效
| 申請號： | 201510611772.3 | 申請日： | 2015-09-23 |
| 公開（公告）號： | CN105154070B | 公開（公告）日： | 2017-04-19 |
| 發明（設計）人： | 邢達;張濤;吳云霞 | 申請（專利權）人： | 華南師范大學 |
| 主分類號： | C09K11/06 | 分類號： | C09K11/06;C07D405/14;C07D405/04;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 廣州市華學知識產權代理有限公司44245 | 代理人： | 裘暉 |
| 地址： | 510631 廣東省*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 基于 點擊 反應 具有 熒光 響應 dna 標記 制備 方法 應用 | ||
1.一種基于光點擊反應且具有熒光響應的DNA標記物，其特征在于：該DNA標記物為化合物W-3，其結構式如式Ⅰ所示：
2.權利要求1所述的基于光點擊反應且具有熒光響應的DNA標記物的制備方法，其特征在于包括如下步驟：
(1)將四唑化合物W-1與氫氧化鋰在四氫呋喃甲醇和水的混合液中加熱攪拌反應，反應終止后調節溶液的pH值至出現紫色沉淀；得到中間體W-2；
(2)將步驟(1)制得的W-2與NHS和EDC在DMF中攪拌反應以活化W-2；反應終止后，加入飽和食鹽水至沉淀析出，得到化合物W-3，即為具有熒光響應的DNA標記物基于光點擊反應且具有熒光響應的DNA標記物；
所述的四唑化合物W-1的結構式如式Ⅲ所示：
3.根據權利要求2所述的基于光點擊反應且具有熒光響應的DNA標記物的制備方法，其特征在于：
步驟(1)中所述的W-1與氫氧化鋰的摩爾比為1:(15～20)。
4.根據權利要求2所述的基于光點擊反應且具有熒光響應的DNA標記物的制備方法，其特征在于：
步驟(1)中所述的加熱攪拌反應的溫度為45℃～55℃。
5.根據權利要求2所述的基于光點擊反應且具有熒光響應的DNA標記物的制備方法，其特征在于：
步驟(1)中所述的加熱攪拌反應的時間為12～14h。
6.根據權利要求2所述的基于光點擊反應且具有熒光響應的DNA標記物的制備方法，其特征在于：
步驟(1)中所述的pH值為2～4.5。
7.根據權利要求2所述的基于光點擊反應且具有熒光響應的DNA標記物的制備方法，其特征在于：
步驟(2)中所述的W-2與NHS和EDC的摩爾比為1:2:2。
8.權利要求1所述的基于光點擊反應且具有熒光響應的DNA標記物在核酸標記領域中的應用。
9.根據權利要求8所述的基于光點擊反應且具有熒光響應的DNA標記物在核酸標記領域中的應用，其特征在于包含如下步驟：
將基于光點擊反應且具有熒光響應的DNA標記物與具有氨基的核酸序列在硼酸鈉緩沖液中避光孵育進行縮合反應，用預冷的無水乙醇將核酸沉降出來，得到DNA標記物標記的核酸。
10.根據權利要求8所述的基于光點擊反應且具有熒光響應的DNA標記物在核酸標記領域中的應用，其特征在于還包括如下步驟：
將制得的DNA標記物標記的核酸與二甲胺基丙基丙烯酰胺在紫外光下發生光點擊反應，得到具有熒光響應的核酸。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于華南師范大學，未經華南師范大學許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201510611772.3/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
