[發(fā)明專(zhuān)利]一種檢測(cè)人類(lèi)ABCB1基因多態(tài)性的試劑盒及其應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510581614.8
• 申請(qǐng)日: 2015-09-10
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN105695453A
• 公開(kāi)（公告）日: 2016-06-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 徐運(yùn);邵淵;張希根
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 南京仁天生物科技有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12N15/11
• 分類(lèi)號(hào): C12N15/11;C12Q1/68
• 代理公司: 南京中新達(dá)專(zhuān)利代理有限公司 32226
• 代理人: 孫鷗;朱杰

1.一種檢測(cè)人類(lèi)ABCB1基因多態(tài)性的試劑盒，包括盒體和裝于盒體內(nèi)的物質(zhì)，其特征在 于：所述盒體內(nèi)的物質(zhì)包括檢測(cè)ABCB1基因上的rs1045642號(hào)SNP位點(diǎn)的特異性引物及特異 性熒光探針、TaqDNA聚合酶、dNTP混合液、MgCl₂溶液、熒光定量PCR反應(yīng)緩沖液和去離子 水；

所述特異性引物中的正義引物和反義引物的序列為：

正義引物：5’-GTGTCCCAGGAGCCCATC-3’，

反義引物：5’-GCTCCCAGGCTGTTTATTTG-3’；

所述特異性熒光探針包括野生型探針和突變性探針，它們的序列為：

野生型探針：5’-FAM-AAGAGATCGTGAGGGCA-MGB-3’

突變型探針：5’-HEX-AAGAGATTGTGAGGGCAG-MGB-3’。

2.如權(quán)利要求1所述的一種檢測(cè)人類(lèi)ABCB1基因多態(tài)性的試劑盒，其特征在于：所述盒 體中各物質(zhì)的含量為：濃度為10μM的特異性引物共0.45μl，其中正義引物和反義引物各 0.225μl；濃度為5μM的特異性熒光探針共0.2μl，其中野生型探針和突變型探針各0.1μl；濃 度為5單位/μl的TaqDNA聚合酶0.02μl；濃度為20mM的dNTP混合液0.1μl；濃度為25mM的 MgCl2溶液0.5μl；5X熒光定量PCR反應(yīng)緩沖液2μl；去離子水4.73μl。

3.如權(quán)利要求1所述的一種檢測(cè)人類(lèi)ABCB1基因多態(tài)性的試劑盒，其特征在于：所述特 異性引物中，正義引物的Tm值為57.1℃，反義引物的Tm值為57.2℃；所述特異性熒光探針 中，野生型探針的Tm值為67℃，突變型探針的Tm值為67℃。

4.如權(quán)利要求1所述的一種檢測(cè)人類(lèi)ABCB1基因多態(tài)性的試劑盒，其特征在于：所述試 劑盒的保存溫度為-20℃。

5.一種檢測(cè)人類(lèi)ABCB1基因多態(tài)性的試劑盒的應(yīng)用，其物征在于：所述試劑盒用于檢測(cè) ABCB1基因上rs1045642號(hào)SNP位點(diǎn)的基因型。