[發明專利]冬麥種子胚芽活性多肽營養素的制備方法

在審

• 申請號: 201510568579.6
• 申請日: 2015-09-09
• 公開（公告）號: CN105053829A
• 公開（公告）日: 2015-11-18
• 發明（設計）人: 曾凡熔
• 申請（專利權）人: 曾慶云
• 主分類號: A23L1/105
• 分類號: A23L1/105;A23L1/305;A23L1/025;A23L1/172
• 代理公司: 廈門南強之路專利事務所(普通合伙) 35200
• 代理人: 馬應森

1.冬麥種子胚芽活性多肽營養素的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

1)將冬麥浸潤；

2)將浸潤后的冬麥進行低溫處理；

3)將低溫處理后的冬麥破碎得細胞漿液，再用EDTA和蛋白酶K處理后保存；

4)將EDTA和蛋白酶K處理后的細胞漿液以胚芽自己的細胞DNA/RNA為擴增的模板，增加DNA/RNA循環擴增的營養元素，設置細胞漿液在模擬的溫控環境下培養，35個循環，每個循環溫度與時間設置如下：

70℃60s；

40℃60s；

60℃180s；

在溫度預先設置好的恒溫加熱器中完成，加熱器放置在旋轉式搖床上，得母液；

5)將步驟4)達到預期擴增時間后的母液超聲波處理，離心，收集上清液，分離純化處理，4～18℃下真空濃縮，噴霧干燥后，即得冬麥種子胚芽活性多肽營養素，呈黃色粉狀，有青麥苗與發酵特殊氣味與滋味。

2.如權利要求1所述冬麥種子胚芽活性多肽營養素的制備方法，其特征在于在步驟1)中，所述冬麥包括但不限于冬小麥、冬燕麥、冬裸麥。

3.如權利要求1所述冬麥種子胚芽活性多肽營養素的制備方法，其特征在于在步驟1)中，所述浸潤采用無菌開水浸泡24h。

4.如權利要求1所述冬麥種子胚芽活性多肽營養素的制備方法，其特征在于在步驟2)中，所述低溫處理分兩階段進行，第一階段的溫度為0～3℃，第一階段的處理時間為10～30h，第二階段的溫度為7～9℃，第二階段的處理時間為10～30h，低溫處理循環4～6；所述第一階段的處理時間優選24h，第二階段的處理時間優選24h，低溫處理循環優選5次。

5.如權利要求1所述冬麥種子胚芽活性多肽營養素的制備方法，其特征在于在步驟3)中，所述破碎是采用勻漿機破碎，勻漿機的膠體磨細度1～7μm,1.1KW。

6.如權利要求1所述冬麥種子胚芽活性多肽營養素的制備方法，其特征在于在步驟3)中，所述EDTA的摩爾濃度為0.005～0.01mol/L；所述蛋白酶K的質量濃度為50μg/ml，蛋白酶K用50mMTris-HCL,10mMCaCL₂pH7.5緩沖液配制。

7.如權利要求1所述冬麥種子胚芽活性多肽營養素的制備方法，其特征在于在步驟3)中，所述處理的溫度為55～65℃，處理的時間為5～48h，所述處理的溫度優選58℃，處理的時間優選36h；所述處理是將蛋白酶K與細胞漿液共同孵育，充分保護并暴露胚芽內的發芽早期DNA/RNA，蛋白酶K已經把細胞內的DNA/RNA酶滅活；所述保存的溫度可為4～8℃。

8.如權利要求1所述冬麥種子胚芽活性多肽營養素的制備方法，其特征在于在步驟4)中，所述DNA/RNA循環擴增的營養元素采用外源鎂、dNTP和TaqDNA聚合酶；所述旋轉式搖床的轉速可為60～100r/min。

9.如權利要求8所述冬麥種子胚芽活性多肽營養素的制備方法，其特征在于所述外源鎂采用Mg++，4.5～5.5mM，摩爾用量為200μmol/L；dNTP采用1MTris-HCl緩沖液，pH7.0～7.5，摩爾用量為200μmol/L；TaqDNA聚合酶的用量為2.5萬單位/10L。

10.如權利要求1所述冬麥種子胚芽活性多肽營養素的制備方法，其特征在于在步驟5)中，所述超聲波處理的超聲波功率為450W，超聲波處理的時間為12～15min；所述分離可在4～8℃離心機8000r/m速度離心10～15min。