[發明專利]一種假白欖酮型二萜類化合物的制備方法

在審

• 申請號: 201510545768.1
• 申請日: 2015-08-31
• 公開（公告）號: CN105153181A
• 公開（公告）日: 2015-12-16
• 發明（設計）人: 張耀洲;馬紅;蓋其靜;杜思邈;楊珊珊;陸洪;龐莉;王歡歡;韓朝;李上文
• 申請（專利權）人: 天津耀宇生物技術有限公司
• 主分類號: C07D493/08
• 分類號: C07D493/08
• 代理公司: 天津市三利專利商標代理有限公司 12107
• 代理人: 李蕊

技術領域

本發明涉及化合物生產領域，尤其是一種假白欖酮型二萜類化合物的制備方法。

背景技術

萜類化合物(Terpenoids)是一類骨架多樣、數量龐大、生物活性廣泛的一類重要的天然藥物化學成分。中藥甘遂的主要成分就是此類化合物，包括三萜類和二萜類化合物，而假白欖酮型二萜類化合物是甘遂二萜類成分之一，多為一個5元環與一個12元環駢合在一起而形成,同時某些位置的羥基形成醚或酯橋。kansuininD就是其中一種，具有廣泛的生物活性，其結構如下：

研究表明，kansuininD存在于甘遂中。現行《中國藥典》收錄的甘遂為大戟科大戟屬植物甘遂的干燥塊根。性寒,味苦；有毒。現代研究表明,甘遂化學成分具有抗氧化、抗腫瘤、抗生育、抗病毒、瀉下和免疫抑制等作用。

但是關于甘遂的化學成分，傳統提取方法都是通過液液萃取的方式進行，該種方法存在許多缺陷，如批次之間不具有重復性，整個提取過程的時間周期長，試劑耗費量大等。

發明內容

本發明所要解決的技術問題在于提供一種假白欖酮型二萜類化合物的制備方法。

為解決上述技術問題，本發明的技術方案是：

一種假白欖酮型二萜類化合物(kansuininD)的制備方法，具體步驟如下：

(1)制備甘遂粗提物：以甘遂為原料，磨成粉末狀得到干燥的甘遂粗粉，甘遂粗粉與乙酸乙酯的料液比按kg/L計1:(8-10)將甘遂粗粉用乙酸乙酯常溫下浸泡5h，間歇攪拌，提取1-3次，靜置過夜，取上清，過濾，所得濾液進行旋轉蒸發至干，溶于正己烷-乙醇溶液中，進行減壓抽濾，得到甘遂濃度為50-500mg/mL的提取液；

(2)對所得到的提取液進行一維液相色譜分離：采用的流動相為二元混合有機相，其中A相是正己烷，B相是乙醇；進樣量為50-300mL/針；流動相流速為600mL/min；檢測器為紫外檢測器，檢測波長200-260nm；梯度洗脫；根據紫外吸收光譜收集目的組分，旋轉蒸發濃縮至干，得到一維液相組分；

(3)用乙醇體積分數為30-70％的乙醇-正己烷二元混合溶劑溶解一維液相組分，溶解至濃度為50-100mg/mL；

(4)進行二維液相色譜分離：采用的流動相為二元混合有機相，其中A相是正己烷，B相是乙醇；進樣量為0.3-1.0mL/針；流動相流速為10-18mL/min；檢測器為紫外檢測器，檢測波長200-260nm；等度洗脫；根據紫外吸收光譜收集目的組分(GS-7-4峰(30.9-35.0min)作為目的組分)，旋轉蒸發濃縮至干，得到二維液相組分；

(5)用乙醇體積分數為10-50％的乙醇-正己烷二元混合溶劑溶解二維液相組分，溶解至濃度為50-200μg/mL；

(6)進行三維液相色譜分離：采用的流動相為二元混合有機相，其中A相是正己烷，B相是乙醇；進樣量為10-100μL/針；流動相流速為3-5mL/min；檢測器為紫外檢測器，檢測波長200-260nm；等度洗脫；根據紫外吸收光譜收集目的組分，旋轉蒸發濃縮至干，得到目的產物。

優選的，上述假白欖酮型二萜類化合物的制備方法，所述步驟(2)中一維液相色譜分離采用的色譜柱為正相硅膠軸向加壓色譜柱，填料為AgelaInnovalsilica(250mm×150mm；10μm,使用時柱溫為室溫或25-40℃。

優選的，上述假白欖酮型二萜類化合物的制備方法，所述步驟(4)中二維液相色譜采用的色譜柱為：HanbonSilica色譜柱(250mm×20mm；10μm,使用時柱溫為室溫或25-40℃。

優選的，上述假白欖酮型二萜類化合物的制備方法，所述步驟(6)中三維液相色譜采用的色譜柱為：AcchromDiol色譜柱(250mm×10mm；10μm，使用時柱溫為室溫或25-40℃。

優選的，上述假白欖酮型二萜類化合物的制備方法，所述步驟(1)(2)(4)(6)中減壓濃縮采用旋轉蒸發儀進行，工藝條件為真空度0.05-0.08Mpa、溫度50-60℃。

優選的，上述假白欖酮型二萜類化合物的制備方法，具體步驟如下：

(1)制備甘遂粗提物：以甘遂為原料，磨成粉末狀得到干燥的甘遂粗粉，甘遂粗粉與乙酸乙酯的料液比按kg/L計1:9將甘遂粗粉用乙酸乙酯常溫下浸泡5h，間歇攪拌，提取3次，靜置過夜，取上清，過濾，所得濾液進行旋轉蒸發至干，溶于正己烷-乙醇溶液中，進行減壓抽濾，得到甘遂濃度為94mg/mL的提取液；