[發(fā)明專利]一種高產(chǎn)酸性蛋白酶的紅曲霉菌株的構(gòu)建方法在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201510533884.1 | 申請(qǐng)日： | 2015-08-27 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN105039386A | 公開（公告）日： | 2015-11-11 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 邱思佳;沈才洪;霍丹群;唐玉明;候長(zhǎng)軍;林鋒 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 瀘州老窖集團(tuán)有限責(zé)任公司;重慶大學(xué);四川省瀘州市釀酒科學(xué)研究所 |
| 主分類號(hào)： | C12N15/80 | 分類號(hào)： | C12N15/80;C12N15/57;C12N1/15;C12R1/645 |
| 代理公司： | 重慶博凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 50212 | 代理人： | 李明;張先蕓 |
| 地址： | 64600*** | 國(guó)省代碼： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 高產(chǎn) 酸性 蛋白酶 曲霉 菌株 構(gòu)建 方法 | ||
1.一種高產(chǎn)酸性蛋白酶的紅曲霉菌株的構(gòu)建方法，其特征在于，先從紅曲霉基因組中擴(kuò)增紅曲霉酸性蛋白酶基因Asp片段，然后將擴(kuò)增得到的所述Asp片段連接到空載體上構(gòu)建紅曲霉酸性蛋白酶的重組表達(dá)載體，將所述紅曲霉酸性蛋白酶的重組表達(dá)載體轉(zhuǎn)化到根癌農(nóng)桿菌中得到重組根癌農(nóng)桿菌，再利用根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將所述重組根癌農(nóng)桿菌導(dǎo)入紅曲霉，得到所述高產(chǎn)酸性蛋白酶的紅曲霉菌株。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述高產(chǎn)酸性蛋白酶的紅曲霉菌株的構(gòu)建方法，其特征在于，所述擴(kuò)增紅曲霉酸性蛋白酶基因Asp片段，是以紅曲霉cDNA為模板，采用引物Asp-ORF-F和Asp-ORF-R進(jìn)行擴(kuò)增；所述引物Asp-ORF-F的序列如SEQIDNO.2所示，引物Asp-ORF-R的序列如SEQIDNO.3所示。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述高產(chǎn)酸性蛋白酶的紅曲霉菌株的構(gòu)建方法，其特征在于，所述空載體為pBC-Hygro質(zhì)粒。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述高產(chǎn)酸性蛋白酶的紅曲霉菌株的構(gòu)建方法，其特征在于，采用凍融法將所述紅曲霉酸性蛋白酶的重組表達(dá)載體轉(zhuǎn)化到根癌農(nóng)桿菌中得到重組根癌農(nóng)桿菌。
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息，商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于瀘州老窖集團(tuán)有限責(zé)任公司;重慶大學(xué);四川省瀘州市釀酒科學(xué)研究所，未經(jīng)瀘州老窖集團(tuán)有限責(zé)任公司;重慶大學(xué);四川省瀘州市釀酒科學(xué)研究所許可，擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購(gòu)買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作，請(qǐng)聯(lián)系【客服】
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