[發(fā)明專利]一種用于治療牛皮癬的抗體藥物在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201510519923.2 | 申請日： | 2015-08-21 |
| 公開（公告）號： | CN105106953A | 公開（公告）日： | 2015-12-02 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 張耀洲;蓋其靜;趙娜 | 申請（專利權(quán)）人： | 天津耀宇生物技術(shù)有限公司 |
| 主分類號： | A61K39/42 | 分類號： | A61K39/42;A61P17/06;C07K16/14;C07K16/06 |
| 代理公司： | 天津市三利專利商標(biāo)代理有限公司 12107 | 代理人： | 李蕊 |
| 地址： | 300457 天津市濱海新區(qū)天津開發(fā)*** | 國省代碼： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 用于 治療 牛皮癬 抗體 藥物 | ||
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及牛皮癬治療藥物領(lǐng)域，尤其是一種用于治療牛皮癬的抗體藥物。
背景技術(shù)
銀屑病是人們所患的常見慢性炎癥性皮膚病，病因尚無確切定論。銀屑病分為四型，其中尋常型銀屑病最為常見。典型損害為境界清楚的紅斑、丘疹，表面覆蓋干燥的多層鱗屑。該病病程長，病情反復(fù)發(fā)作，臨床治療較為棘手。目前銀屑病的治療藥物很多，但是由于其病因錯綜復(fù)雜，許多治療藥物的療效并不能確定，僅以改善患者癥狀為主。傳統(tǒng)的治療藥物有較多不良反應(yīng)，相比之下，抗銀屑病的生物制劑有針對性強(qiáng)，療效確切，不良反應(yīng)少的優(yōu)勢。近年來有不少針對銀屑病免疫發(fā)病機(jī)制研制了不少具有靶位特異性的生物制劑，多數(shù)顯示出良好的應(yīng)用前景。但從患者的患處取標(biāo)本培養(yǎng)分離出治病真菌來做抗原再獲得的抗體未見研究。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于提供一種用于治療牛皮癬的抗體藥物。
為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明的技術(shù)方案是：
一種用于治療牛皮癬的抗體藥物，為銀屑病真菌(致病菌)作為抗原制備的多克隆抗體，所述多克隆抗體是由下述方法獲得的：
(1)制備抗原，將致病菌分別按照以下方法進(jìn)行操作，其中，所述致病菌為煙曲霉、熱帶念珠菌、近平滑念珠菌和/或黑曲霉：
A致病菌接種馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基中，28℃,160rpm震蕩培養(yǎng)，菌液離心，收集沉淀，向沉淀中加入3.7％甲醛，4℃過夜滅活；
b離心收集滅活后的菌體，用生理鹽水重懸，細(xì)胞超聲粉碎儀粉碎，BCA法測定后制備成總蛋白量0.5mg/ml的溶液；
c取蛋白溶液與等體積的弗氏完全佐劑混合制備首次免疫抗原，與等體積弗氏不完全佐劑制備成加強(qiáng)免疫抗原備用；
(2)抗體制備：首次免疫，1ml首次免疫抗原皮下注射新西蘭大白兔后15、30、45天分別用加抗原進(jìn)一步免疫加強(qiáng)，免疫加強(qiáng)最后一次注射后的一周內(nèi)采集抗血清，獲得各種分離鑒定出真菌的抗體血清。
優(yōu)選的，上述用于治療牛皮癬的抗體藥物，所述步驟(1)中致病菌為熱帶念珠菌和/或近平滑念珠菌。
優(yōu)選的，上述用于治療牛皮癬的抗體藥物，還包含藥學(xué)可接受的輔料、賦形劑。
優(yōu)選的，上述用于治療牛皮癬的抗體藥物，為膏劑。
上述用于治療牛皮癬的抗體藥物的制備方法，具體制備步驟如下：
(1)制備抗原，將致病菌分別按照以下方法進(jìn)行操作，其中，所述致病菌為煙曲霉、熱帶念珠菌、近平滑念珠菌和/或黑曲霉：
A致病菌接種馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基中，28℃,160rpm震蕩培養(yǎng)，菌液離心，收集沉淀，向沉淀中加入3.7％甲醛，4℃過夜滅活；
b離心收集滅活后的菌體，用生理鹽水重懸，細(xì)胞超聲粉碎儀粉碎，BCA法測定后制備成總蛋白量0.5mg/ml的溶液；
c取蛋白溶液與等體積的弗氏完全佐劑混合制備首次免疫抗原，與等體積弗氏不完全佐劑制備成加強(qiáng)免疫抗原備用；
(2)抗體制備：首次免疫，1ml首次免疫抗原皮下注射新西蘭大白兔后15、30、45天分別用加抗原進(jìn)一步免疫加強(qiáng)，免疫加強(qiáng)最后一次注射后的一周內(nèi)采集抗血清，獲得各種分離鑒定出真菌的抗體血清。
優(yōu)選的，上述用于治療牛皮癬的抗體藥物的制備方法，所述步驟(1)中致病菌為熱帶念珠菌和/或近平滑念珠菌。
優(yōu)選的，上述用于治療牛皮癬的抗體藥物的制備方法，所述步驟(1)中致病菌是由下述方法得到的：
(1)取標(biāo)本：常規(guī)75％酒精消毒后，刮取銀屑病人的患處取表皮細(xì)胞(皮屑)及深層表皮細(xì)胞，接種于含0.05％氯霉素的沙氏葡萄糖瓊脂斜面上，置于28℃培養(yǎng)10-15天；
(2)分離真菌：采用劃線分離法于沙氏葡萄糖瓊脂平板上接種，置于28℃溫度下培養(yǎng)，待培養(yǎng)出單菌落，鑒定真菌，用甘油冷凍法保存鑒定出菌種。
優(yōu)選的，上述用于治療牛皮癬的抗體藥物的制備方法，將所述步驟(2)所得各種抗體的血清，進(jìn)行效價測定，用無菌生理鹽水適當(dāng)稀釋后，按比例混合，加入3％水溶性氮酮、以及乳膏基質(zhì)制成膏劑。
本發(fā)明的有益效果是：
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