[發明專利]一種庫爾勒香梨花絲細胞立體染色方法

有效

• 申請號: 201510517411.2
• 申請日: 2015-08-21
• 公開（公告）號: CN105136547B
• 公開（公告）日: 2018-01-02
• 發明（設計）人: 許娟;李鵬;李勇;郭春苗
• 申請（專利權）人: 新疆農業科學院園藝作物研究所
• 主分類號: G01N1/30
• 分類號: G01N1/30
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及生物細胞技術領域，具體涉及一種關于庫爾勒香梨花絲細胞立體染色的技術領域。

背景技術

庫爾勒香梨是薔薇科梨亞科梨屬新疆梨的一種，是新疆巴州地區和阿克蘇地區的主栽果樹品種，因香味濃郁、皮薄肉脆、清甜可口、細嫩多汁、營養豐富而聞名于世，已成為新疆重要的出口創匯果品之一。新疆林果辦2011年數據顯示，新疆庫爾勒香梨栽培面積已達5.10萬hm²，掛果面積約3.64萬hm²，年產量約70萬噸，銷售以國內市場為主，產值約20億元。庫爾勒香梨有“果中王子”之稱，具有保護心臟，減輕疲勞，增強心肌活力，降血壓等多重功效，尤其能祛痰止咳，消熱解暑，滋陰潤肺，深受消費者青睞。庫爾勒香梨果皮表面蠟質厚，成熟后微帶紅暈，肉白酥脆，多汁且果香濃郁，耐貯藏，甜度高，皮薄汁多，果點和銹斑少且小，肉質細脆，無公害或綠色產品逐年增多，是庫爾勒香梨國內外市場的競爭優勢。

研究發現，近幾年香梨種植者為了追求高產，在管理過程中授粉樹種搭配不合理，人工授粉時選用花粉種類不當，往往導致庫爾勒香梨果實大小不一，果形不規則，粗皮現象嚴重，果皮著色不均勻，石細胞較多，可食用部分較少，果心微酸等現象發生。庫爾勒香梨出現的上述現象和花粉發育狀況、花粉質感有很重要的關系，而花絲是花粉發育過程中營養物質、水分、礦質元素以及激素等物質的重要運輸通道，所以很有必要對花絲的細胞結構進行研究，為探明花粉發育過程奠定基礎，為庫爾勒香梨的繁殖生物學研究提供基礎方法。

目前，國內科研工作者在研究庫爾勒香梨花絲細胞結構中所使用的方法主要采用常見的艾氏蘇木精整體染色法，但艾氏蘇木精整體染色法配制溶液較為復雜，一般需要敞口后熟2個月以上，染色時間不宜把握，而且對纖維素染色較重，不能很好地觀察花絲內部各種細胞的結構。

目前，關于操作簡便的庫爾勒香梨花絲細胞立體染色方法，能使庫爾勒香梨花絲的表皮細胞、中層細胞和輸導組織結構清楚著色，各部分細胞區分明顯的研究還未見報道。在中國專利公開號CN1280193A、CN103323313A、CN 103033409 A等這些文獻中公開了細胞或某一種細胞的染色方法，但是，本領域熟知不同的植物其細胞結構差異性極大，對于同一植物不同器官的細胞結構也是具有明顯的差異，現有報道的現有技術并不適用于庫爾勒香梨花絲細胞的染色。因此在研究庫爾勒香梨花絲細胞的立體染色方法時需要經過大量的勞動，并且需要付出創造性的勞動才能夠獲得，提供一種操作方法簡單，染色時間易于控制，可適用于大規模機械化處理，同時節約時間和材料的庫爾勒香梨花絲細胞立體染色方法，具有現實的意義和作用。

發明內容

針對目前未見操作簡便的庫爾勒香梨花絲細胞立體染色方法，使庫爾勒香梨花絲的表皮細胞、中層細胞和輸導組織結構清楚著色，各部分細胞區分明顯的研究的技術現狀，以及現有常見的艾氏蘇木精整體染色法配制溶液較為復雜，一般需要敞口后熟2個月以上，染色時間不宜把握，而且對纖維素染色較重，不能很好地觀察花絲內部各種細胞結構的缺點和不足，本發明旨在于提供一種庫爾勒香梨花絲細胞立體染色方法，能夠將庫爾勒香梨花絲細胞的表皮細胞、花絲中層細胞和輸導組織細胞清楚著色，明顯區分，有立體染色效果，且操作方法簡單，染色時間易于控制，可適用于大規模機械化處理，同時節約時間和材料，不需要加蓋載玻片即可直接觀察，也可以經酒精溶液、二甲苯處理后制作成永久切片，用于研究庫爾勒香梨花絲內部結構以及花絲在花粉發育過程中的作用。

為達到上述目的，本發明采用如下技術方案：