[發(fā)明專利]一種小叢紅景天的離體培養(yǎng)方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201510514981.6 | 申請日： | 2015-08-20 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN105191790B | 公開（公告）日： | 2017-05-24 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 王俊麗;費(fèi)良丹;張榮榮;黃婧婧;郭萌;彭耀;張一鳴 | 申請（專利權(quán)）人： | 中央民族大學(xué) |
| 主分類號(hào)： | A01H4/00 | 分類號(hào)： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司11245 | 代理人： | 關(guān)暢,張立娜 |
| 地址： | 100081 北*** | 國省代碼： | 北京;11 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 紅景天 培養(yǎng) 方法 | ||
1.一種小叢紅景天的離體培養(yǎng)方法，包括如下步驟：
(1)將小叢紅景天的莖段接種于愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)，得到愈傷組織；
(2)將步驟(1)所得愈傷組織接種于不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，進(jìn)行不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)，得到不定芽；
(3)將步驟(2)所得不定芽接種于不定芽增殖培養(yǎng)基上，進(jìn)行不定芽增殖培養(yǎng)，得到叢生芽；
(4)將步驟(3)所得叢生芽接種于生根培養(yǎng)基上，進(jìn)行生根培養(yǎng)，得到再生苗；
所述愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基是在MS固體培養(yǎng)基中加入6-BA、NAA和2,4-D后得到的培養(yǎng)基；所述愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基中6-BA的終濃度為1.0-1.5mg/L、NAA的終濃度為0.2-0.5mg/L、2,4-D的終濃度為0.2-0.5mg/L；
所述不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基是如下(a1)或(a2)所示培養(yǎng)基：
(a1)在MS固體培養(yǎng)基中加入6-BA和NAA后得到的培養(yǎng)基；所述不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中6-BA的終濃度為0.5-1.0mg/L、NAA的終濃度為0.1-0.5mg/L；
(a2)在MS固體培養(yǎng)基中加入TDZ和NAA后得到的培養(yǎng)基；所述不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中TDZ的終濃度為0.5-1.0mg/L、NAA的終濃度為0.5-1.0mg/L；
所述不定芽增殖培養(yǎng)基是在MS固體培養(yǎng)基中加入TDZ后得到的培養(yǎng)基；所述不定芽增殖培養(yǎng)基中TDZ的終濃度為0.5-2.0mg/L；
所述生根培養(yǎng)基是在MS固體培養(yǎng)基中加入IBA后得到的培養(yǎng)基；所述生根培養(yǎng)基中IBA的終濃度為1.0-2.0mg/L。
2.一種小叢紅景天的離體培養(yǎng)方法，包括如下步驟：
(1)將小叢紅景天的莖段接種于愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)，得到愈傷組織；
(2)將步驟(1)所得愈傷組織接種于不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，進(jìn)行不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)，得到不定芽；
(3)將步驟(2)所得不定芽接種于不定芽增殖培養(yǎng)基上，進(jìn)行不定芽增殖培養(yǎng)，得到叢生芽；
(4)將步驟(3)所得叢生芽接種于生根培養(yǎng)基上，進(jìn)行生根培養(yǎng)，得到再生苗；
所述愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基是在MS固體培養(yǎng)基中加入6-BA、NAA和2,4-D后得到的培養(yǎng)基；所述愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基中6-BA的終濃度為0.85mg/L、NAA的終濃度為0.34mg/L、2,4-D的終濃度為0.33mg/L；
所述不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基是如下(a1)或(a2)所示培養(yǎng)基：
(a1)在MS固體培養(yǎng)基中加入6-BA和NAA后得到的培養(yǎng)基；所述不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中6-BA的終濃度為0.5-1.0mg/L、NAA的終濃度為0.1-0.5mg/L；
(a2)在MS固體培養(yǎng)基中加入TDZ和NAA后得到的培養(yǎng)基；所述不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中TDZ的終濃度為0.5-1.0mg/L、NAA的終濃度為0.5-1.0mg/L；
所述不定芽增殖培養(yǎng)基是在MS固體培養(yǎng)基中加入TDZ后得到的培養(yǎng)基；所述不定芽增殖培養(yǎng)基中TDZ的終濃度為0.5-2.0mg/L；
所述生根培養(yǎng)基是在MS固體培養(yǎng)基中加入IBA后得到的培養(yǎng)基；所述生根培養(yǎng)基中IBA的終濃度為1.0-2.0mg/L。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述不定芽增殖培養(yǎng)基中TDZ的終濃度為0.5-1.0mg/L。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述生根培養(yǎng)基中IBA的終濃度為1.0mg/L。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述MS固體培養(yǎng)基中的碳源為蔗糖；所述MS固體培養(yǎng)基中的凝膠劑為瓊脂。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于：所述蔗糖在所述MS固體培養(yǎng)基中的終濃度為30g/L；所述瓊脂在所述MS固體培養(yǎng)基中的終濃度為7g/L。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于：步驟(1)中進(jìn)行所述愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)的條件、步驟(2)中進(jìn)行所述不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)的條件、步驟(3)中進(jìn)行所述不定芽增殖培養(yǎng)的條件，以及步驟(4)中進(jìn)行所述生根培養(yǎng)的條件，均為：溫度25±2℃、光照時(shí)間12h/天、光照強(qiáng)度30～40mmol·m-2·s-1。
8.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述莖段的長度為0.5cm。
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