[發(fā)明專利]一種定點(diǎn)突變的大腸桿菌DNA光修復(fù)酶及其構(gòu)建方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201510511411.1 | 申請日： | 2015-08-18 |
| 公開（公告）號： | CN105087535B | 公開（公告）日： | 2017-06-06 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 文斌;徐蕾;王鵬;朱國萍;田常青;曹正宇;黃士平 | 申請（專利權(quán)）人： | 安徽師范大學(xué) |
| 主分類號： | C12N9/88 | 分類號： | C12N9/88;C12N15/60;C12N15/70;C12N1/21 |
| 代理公司： | 北京元本知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所11308 | 代理人： | 范奇 |
| 地址： | 241000*** | 國省代碼： | 安徽;34 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 定點(diǎn) 突變 大腸桿菌 dna 修復(fù) 及其 構(gòu)建 方法 | ||
1.一種定點(diǎn)突變的大腸桿菌DNA光修復(fù)酶，其特征在于：它具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸的序列。
2.一種編碼權(quán)利要求1所述的定點(diǎn)突變大腸桿菌DNA光修復(fù)酶的基因，其特征在于：其含有SEQ ID NO:2的核苷酸序列。
3.一種載體，其特征在于：其含有權(quán)利要求2所述的核苷酸序列。
4.一種宿主細(xì)胞，其特征在于：其含有權(quán)利要求2所述的基因或核苷酸序列，或者含有權(quán)利要求3所述的載體。
5.權(quán)利要求1所述的一種定點(diǎn)突變的大腸桿菌DNA光修復(fù)酶的構(gòu)建方法，包括以下步驟：從大腸桿菌(Escherichia coli)中獲得DNA光修復(fù)酶基因，設(shè)計突變引物得到突變基因的片段，連接突變基因片段與pET22b質(zhì)粒，構(gòu)建重組表達(dá)質(zhì)粒pET22b-A377N；該重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞，構(gòu)建用于突變體酶表達(dá)的基因工程菌BL21(DE3)/pET22b-A377N；
所述的377位的突變引物為：
L:5′-GGTGATTTGGCAAATAATAAC-3′
R:5′-TATTATTTGCCAAATCACCA-3′。
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