[發(fā)明專利]一種生產(chǎn)羊抗人胱抑素C蛋白抗血清的方法在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201510475366.9 | 申請(qǐng)日： | 2015-08-05 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN105061599A | 公開（公告）日： | 2015-11-18 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 徐志偉;張傳明;袁金城 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 海奧斯生物科技鎮(zhèn)江有限公司 |
| 主分類號(hào)： | C07K16/38 | 分類號(hào)： | C07K16/38;C07K16/06 |
| 代理公司： | 南京蘇高專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 許丹丹 |
| 地址： | 212446 江蘇省鎮(zhèn)*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 生產(chǎn) 羊抗人胱抑素 蛋白 血清 方法 | ||
1.一種生產(chǎn)羊抗人胱抑素C蛋白抗血清的方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)抗原準(zhǔn)備：選用人胱抑素C蛋白抗原、用無菌PBS和弗氏佐劑制成免疫原乳劑，備用；
(2)第一次注射：使用上述免疫原乳劑對(duì)羊進(jìn)行注射，注射部位為左右足底2點(diǎn)、左右腹股溝皮下4點(diǎn)、頸部兩側(cè)皮下2點(diǎn)、背部皮下4點(diǎn)，總共12個(gè)注射點(diǎn)，平均注射；
(3)第二次注射：第一次注射后15天進(jìn)行第二次注射，注射部位為左右腹股溝淋巴結(jié)內(nèi)2點(diǎn)、左右腹股溝皮下4點(diǎn)、頸部兩側(cè)皮下2點(diǎn)、背部皮下4點(diǎn)，共計(jì)12個(gè)注射點(diǎn)，平均注射；
(4)第三次注射：第二次注射后9-11天進(jìn)行第三次注射，注射部位為左右腹股溝皮下4點(diǎn)、頸部兩側(cè)皮下2點(diǎn)、背部皮下4點(diǎn)，共計(jì)10個(gè)注射點(diǎn)，平均注射；
(5)第四次注射：第三次注射后9-11天進(jìn)行第四次注射，注射部位為左右腹股溝皮下4點(diǎn)、頸部兩側(cè)皮下2點(diǎn)、背部皮下4點(diǎn)，共計(jì)10個(gè)注射點(diǎn)，平均注射；
(6)第五次注射：第四次注射后9-11天進(jìn)行第五次注射，注射部位為左右腹股溝皮下4點(diǎn)、頸部兩側(cè)皮下2點(diǎn)、背部皮下4點(diǎn)，共計(jì)10個(gè)注射點(diǎn)，平均注射；
(7)第六次注射：第五次注射后9-11天進(jìn)行第六次注射，注射部位為左右腹股溝皮下4點(diǎn)、頸部兩側(cè)皮下2點(diǎn)、背部皮下4點(diǎn)，共計(jì)10個(gè)注射點(diǎn)，平均注射；
(8)第七次注射：第六次注射后9-11天進(jìn)行第七次注射，注射部位為左右腹股溝皮下4點(diǎn)、頸部兩側(cè)皮下2點(diǎn)、背部皮下4點(diǎn)，共計(jì)10個(gè)注射點(diǎn)，平均注射；
(9)第八次注射：第七次注射后9-11天進(jìn)行第八次注射，注射部位為左右腹股溝皮下4點(diǎn)、頸部兩側(cè)皮下2點(diǎn)、背部皮下4點(diǎn)，共計(jì)10個(gè)注射點(diǎn)，平均注射；
(10)取血清：第八次注射五天后對(duì)免疫的羊靜脈采血，血液放入38.5℃水箱中1小時(shí)，待血清充分析出，經(jīng)離心沉淀分離出抗血清，放至2～8℃冰箱保存；
(11)血清效價(jià)檢測(cè)：取上述抗血清，檢測(cè)效價(jià)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生產(chǎn)羊抗人胱抑素C蛋白抗血清的方法，其特征在于，所述第一次注射前乳化用的弗氏佐劑為完全弗氏佐劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生產(chǎn)羊抗人胱抑素C蛋白抗血清的方法，其特征在于，所述第二次、第三次、第四次、第五次、第六次、第七次和第八次注射前乳化用的弗氏佐劑為不完全弗氏佐劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生產(chǎn)羊抗人胱抑素C蛋白抗血清的方法，其特征在于，所述第一次注射的劑量為每只羊0.25mg人胱抑素C蛋白抗原。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生產(chǎn)羊抗人胱抑素C蛋白抗血清的方法，其特征在于，所述第二次注射的劑量為每只羊0.5mg人胱抑素C蛋白抗原。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生產(chǎn)羊抗人胱抑素C蛋白抗血清的方法，其特征在于，所述第三次、第四次、第五次、第六次、第七次和第八次注射的劑量為每只羊1mg人胱抑素C蛋白抗原。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生產(chǎn)羊抗人胱抑素C蛋白抗血清的方法，其特征在于，所述血清效價(jià)檢測(cè)的方法為雙擴(kuò)免疫法。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生產(chǎn)羊抗人胱抑素C蛋白抗血清的方法，其特征在于，所述羊?yàn)橥辽窖颉?/p>
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