[發明專利]一種交聯線粒體靶向阿霉素脂質體及其制備方法

有效

• 申請號: 201510469458.6
• 申請日: 2015-08-03
• 公開（公告）號: CN105055315B
• 公開（公告）日: 2017-10-31
• 發明（設計）人: 李莉;顧忠偉;姜雷;孫家維
• 申請（專利權）人: 四川大學
• 主分類號: A61K9/127
• 分類號: A61K9/127;A61K47/24;A61K31/704;A61P35/00
• 代理公司: 成都科海專利事務有限責任公司51202
• 代理人: 黃幼陵,周敏

技術領域

本發明屬于藥物及其制備技術領域，具體涉及一種抗腫瘤藥物脂質體及其制備方法。

背景技術

化療是治療癌癥的主要手段之一，但目前癌癥患者化療后的死亡率仍然居高不下。多藥耐藥(multidrug resistance，MDR)是臨床上化療失敗的主要原因之一。阿霉素是癌癥化療常用的藥物，但阿霉素等化療藥物的大量使用容易使細胞產生耐藥性。腫瘤細胞的耐藥性分為先天性與后天獲得性兩大類。研究表明，腫瘤細胞基因或基因表型發生變化引起細胞凋亡通路改變，最終導致腫瘤先天耐藥性的出現。線粒體是細胞的“動力工廠”，同時也是“自殺武器庫”，能啟動細胞凋亡通路，因而腫瘤細胞先天性耐藥與線粒體功能異常密切相關。以線粒體作為抗癌藥物傳遞系統的靶點，將傳統化療藥物遞送到腫瘤細胞的線粒體、促使線粒體啟動凋亡通路，釋放細胞色素C，激活caspase9/3，從而實現腫瘤細胞“自殺”式死亡，這將是克服腫瘤先天性耐藥性，提高腫瘤治療效果的一種有效手段。

CN104523723A提供了一種由嵌段共聚物葉酸-聚乙二醇-聚天冬氨酸、線粒體靶向阿霉素、三苯基磷(TPP-DOX)和阿霉素構成的線粒體靶向膠束載藥系統。該膠束載藥系統具有線粒體靶向功能，但在將藥物阿霉素遞送到腫瘤細胞線粒體的過程中存在以下問題：(1)葉酸是疏水性分子，在水溶液環境中，根據親疏水特性，葉酸分子更傾向于分布在膠束的疏水內核中而不是分布在膠束的親水外層，從而導致細胞對葉酸修飾的載體攝取率低下，影響抗腫瘤效果；(2)三苯基磷是一種有機磷農藥，對眼、上呼吸道、粘膜和皮膚有刺激性，且有神經毒性。毒理學研究資料顯示，LD50700mg/kg(大鼠經口)，800～1600mg/kg(小鼠經口)，LC5012167mg/m3，4小時(大鼠吸入)。因此將三苯基磷用于藥用材料存在安全隱患。目前未見有關具有線粒體靶向功能的阿霉素脂質體報道。

發明內容

本發明的目的在于針對現有技術的不足，提供一種交聯線粒體靶向阿霉素脂質體及其制備方法，以使該脂質體不僅具有線粒體靶向性，而且腫瘤細胞攝取量大，安全性高。

本發明所述交聯線粒體靶向阿霉素脂質體，由鹽酸阿霉素、磷脂、膽固醇和可交聯線粒體靶向聚乙二醇化磷脂藥用材料組成，所述鹽酸阿霉素與磷脂的質量比為1：(5～20)，所述磷脂、膽固醇、可交聯線粒體靶向聚乙二醇化磷脂藥用材料的摩爾比為(50～90)：(2～47)：(3～8)，所述可交聯線粒體靶向聚乙二醇化磷脂藥用材料的結構式為

所述結構式中，n＝10，12，14，16。

上述交聯線粒體靶向阿霉素脂質體，所述磷脂為大豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂、氫化卵磷脂中的一種。

本發明所述交聯線粒體靶向阿霉素脂質體的制備方法，工藝步驟如下：

(1)可交聯線粒體靶向聚乙二醇化磷脂藥用材料的制備

以脂肪酸酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-馬來酰亞胺、多肽D-(KLAKLAK)₂-C₅和有機堿為原料，多肽D-(KLAKLAK)₂-C₅、有機堿、脂肪酸酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-馬來酰亞胺的摩爾比為(1～3)：(1～3)：1，所述多肽D-(KLAKLAK)₂-C₅的氨基酸序列為序列表中SEQ ID NO：1所述；

在氮氣保護下，將脂肪酸酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-馬來酰亞胺、有機堿和第一溶劑混合均勻得到第一溶液，所述第一溶劑的用量應使第一溶液中脂肪酸酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-馬來酰亞胺的濃度為100～300mmol/L；

在氮氣保護下，將多肽D-(KLAKLAK)₂-C₅溶于第二溶劑中得到第二溶液，第二溶劑的用量應使第二溶液中多肽D-(KLAKLAK)₂-C₅的濃度為100～900mol/L；

將第一溶液和第二溶液混合，在避光、攪拌下于20～40℃反應12～48小時，反應結束后除去溶劑得到固態物質，將所得固態物質用氯仿或二甲亞砜溶解后過濾掉不溶物，收集濾液，除去濾液中的溶劑即得到可交聯線粒體靶向聚乙二醇化磷脂藥用材料；

(2)交聯線粒體靶向阿霉素脂質體的制備