[發明專利]一種產木聚糖酶微生物甄別培養基及其培養方法有效
| 申請號: | 201510464175.2 | 申請日: | 2015-08-03 |
| 公開(公告)號: | CN105063170B | 公開(公告)日: | 2018-11-13 |
| 發明(設計)人: | 郭剛;張鳳娟;楊曉琳;陳乾;郭素霞 | 申請(專利權)人: | 中國熱帶農業科學院海口實驗站 |
| 主分類號: | C12Q1/04 | 分類號: | C12Q1/04 |
| 代理公司: | 北京細軟智谷知識產權代理有限責任公司 11471 | 代理人: | 王淑玲 |
| 地址: | 570100*** | 國省代碼: | 海南;46 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 聚糖 微生物 甄別 培養基 及其 培養 方法 | ||
1.一種微生物甄別培養基,其特征在于,包括胡蘿卜、西紅柿汁以及底物;所述底物為用檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液分別配制的燕麥木聚糖、樺木木聚糖、阿拉伯木聚糖、木寡糖xylo-oligo 95P的等濃度比混合溶液;
所述胡蘿卜切成片并刻劃連續凹槽;
所述西紅柿汁和底物的體積比為300:1。
2.一種利用權利要求1所述微生物甄別培養基的培養微生物的方法,其特征在于,包括步驟:
(1)取胡蘿卜切成片,在胡蘿卜片上刻劃連續凹槽,并將胡蘿卜片預先放置在培養皿中,所述培養皿中預先鋪有無菌濾紙或無菌紗布,所述無菌濾紙或無菌紗布含有無菌水;
(2)將西紅柿經勻漿器研磨至無顆粒狀碎片,過濾取濾液,所述濾液滅菌后即得所述西紅柿汁,取樣品液與西紅柿汁以及底物混合,西紅柿汁、樣品液、底物,三者的體積比為300:100:1,滴于上述胡蘿卜片的凹槽中,使其均勻分布于所述微生物甄別培養基的凹槽中;底物為檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液分別配制的燕麥木聚糖、樺木木聚糖、阿拉伯木聚糖、木寡糖xylo-oligo 95P的等濃度比混合溶液;
(3)在室溫下靜置培養2-4天;
(4)取得在胡蘿卜片上生長的微生物。
3.一種利用權利要求1所述微生物甄別培養基的篩選木聚糖酶活性目標菌株的方法,其特征在于,包括步驟:
1)將胡蘿卜切成片;
2)在胡蘿卜片上刻劃連續凹槽;
3)在所述的胡蘿卜片凹槽中傾倒西紅柿汁、樣品液、底物混合液,三者的體積比為300:100:1,使上述混合液均勻分布于凹槽內;
4)在室溫下靜置培養2-4天;
5)取得在微生物甄別培養基的胡蘿卜片表面形成創傷的微生物;
6)將步驟5)得到的微生物進行透明圈法復篩;
上述混合液的制作方法為:將西紅柿經勻漿器研磨至無顆粒狀碎片,過濾取濾液,所述濾液滅菌后即得所述西紅柿汁;所述底物為檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液分別配制的燕麥木聚糖、樺木木聚糖、阿拉伯木聚糖、木寡糖xylo-oligo 95P的等濃度比混合溶液。
4.根據權利要求3所述的篩選木聚糖酶活性目標菌株的方法,其特征在于,所述的復篩用于篩選木聚糖酶、甘露聚糖酶和果膠酶產酶菌株以及復合產酶菌株。
5.根據權利要求3所述的篩選木聚糖酶活性目標菌株的方法,其特征在于,還包括步驟7)將步驟6)得到的微生物進行木聚糖酶活性定量復篩。
6.利用權利要求1所述的微生物甄別培養基在菌株的保藏及菌株的復壯中的用途,所述的保藏是常溫保藏,其特征在于,所述的菌株是木聚糖酶、甘露聚糖酶和果膠酶產酶菌株。
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