[發(fā)明專利]含半乳糖基殼聚糖分子的海藻酸鹽水凝膠微球載體及應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510447657.7
• 申請日: 2015-07-27
• 公開（公告）號: CN106701730B
• 公開（公告）日: 2020-01-07
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 于煒婷;婁茹云;宋益哲;鄭會珍;馬小軍
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所
• 主分類號: C12N11/10
• 分類號: C12N11/10;C12N11/04
• 代理公司: 21002 沈陽科苑專利商標(biāo)代理有限公司
• 代理人: 馬馳

本發(fā)明涉及了一種內(nèi)部含有半乳糖基殼聚糖分子的海藻酸鹽包埋型水凝膠微球載體及其制備方法。半乳糖基團(tuán)通過酰胺化反應(yīng)接枝到殼聚糖分子上，在殼聚糖與海藻酸共同形成的微膠囊內(nèi)培養(yǎng)肝細(xì)胞。經(jīng)實(shí)驗證實(shí)，半乳糖基接枝的殼聚糖與海藻酸共同制備的微膠囊用來培養(yǎng)大鼠原代肝細(xì)胞，很好的維持了肝細(xì)胞的活性及功能。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及了一種海藻酸鹽水凝膠微載體，具體地說是一種內(nèi)部含有半乳糖基殼聚糖分子的海藻酸鹽水凝膠微球載體及其制備與應(yīng)用。

背景技術(shù)

具有生物活性的物質(zhì)被包封在選擇性透過膜中，形成球狀的微膠囊，稱之為“生物微膠囊”[Chang TMS.Hemoglobin corpuscles.Research report for honoursphysiology.Medical Library,McGill University,1957]。90年代以來，以生物微膠囊作為細(xì)胞的免疫隔離和運(yùn)載工具，利用基因重組細(xì)胞或原代細(xì)胞的代謝產(chǎn)物來調(diào)節(jié)機(jī)體生理功能，治療相關(guān)疾病成為生物醫(yī)學(xué)工作者的研究熱點(diǎn)[Basic D,Vacek I,Sun AM.Microencapsulation and transplantation of engineered cells：a new approachto somatic gene therapy.Art Cells Blood Subs ImmobBiotechnol,1996,24(3)：219-255]。海藻酸因其具有優(yōu)良的物理化學(xué)性能和生物醫(yī)學(xué)性能，成為微囊化技術(shù)的主要材料。現(xiàn)有的微囊化技術(shù)在培養(yǎng)肝細(xì)胞時，由于肝細(xì)胞貼壁依賴的生長特性，微囊內(nèi)部三維立體環(huán)境不能夠使肝細(xì)胞迅速適應(yīng)生長。半乳糖基團(tuán)是肝細(xì)胞表面去唾液酸糖蛋白受體的特異性配體，能夠特異性識別肝細(xì)胞表面去唾液酸糖蛋白受體，因此，在微囊材料上引入肝靶向的半乳糖基團(tuán)，可誘導(dǎo)和提高肝細(xì)胞在微膠囊內(nèi)部的黏附和增殖行為[Jun Yang,Galactosylated alginate as a scaffold for hepatocytes entrapment,Biomaterials,2002,23:471-479]。目前在微囊內(nèi)部引入半乳糖基團(tuán)可通過在海藻酸上的共混或共價修飾。含有半乳糖基團(tuán)的大分子物質(zhì)[Seog-Jin Seo,Yun-Jaie Choi,Alginatemicrocapsules prepared with xyloglucan as a synthetic extracellular matrixfor hepatocyte attachment,Biomaterials,2005,26:3607-3615]主要通過與海藻酸共混制備微膠囊來發(fā)揮作用，共混的物質(zhì)易發(fā)生泄漏因此導(dǎo)致了這類微膠囊的穩(wěn)定性降低；而針對于海藻酸的共價修飾主要發(fā)生在海藻酸的羧基部位，羧基位點(diǎn)的占據(jù)使得海藻酸在凝膠化反應(yīng)形成微膠囊的時候凝膠化程度降低，為了不過度影響海藻酸的成膠性能，半乳糖基取代度受到限制。[Ivan Donati,AmedeoVetere,Galactose-Substituted Alginate:Preliminary Characterization and Study of Gelling Properties,Biomacromolecules,2003,4:624-631]。由于微膠囊穩(wěn)定性及半乳糖基取代度的限制，無論是共混或共價修飾海藻酸，目前報道的方法中均無法在微膠囊內(nèi)部引入較高濃度的半乳糖基團(tuán)。