[發明專利]含半乳糖基殼聚糖分子的海藻酸鹽水凝膠微球載體及應用

有效

• 申請號: 201510447657.7
• 申請日: 2015-07-27
• 公開（公告）號: CN106701730B
• 公開（公告）日: 2020-01-07
• 發明（設計）人: 于煒婷;婁茹云;宋益哲;鄭會珍;馬小軍
• 申請（專利權）人: 中國科學院大連化學物理研究所
• 主分類號: C12N11/10
• 分類號: C12N11/10;C12N11/04
• 代理公司: 21002 沈陽科苑專利商標代理有限公司
• 代理人: 馬馳

1.一種內部含有半乳糖基殼聚糖分子的海藻酸鹽包埋型水凝膠微球載體，其特征在于：海藻酸鹽包埋型水凝膠微球載體內部含有半乳糖基殼聚糖分子，其中，半乳糖基殼聚糖分子與海藻酸鹽分子間形成靜電絡合；

該內部含有半乳糖基殼聚糖分子的海藻酸鹽包埋型水凝膠微球載體的制備方法為：

1）乳糖酸與殼聚糖經過共價修飾制備半乳糖基殼聚糖材料，其中，殼聚糖接枝半乳糖基團的接枝率為（每100個殼聚糖單體接枝乳糖酸分子的百分數） 1%-99%；

2）分別配制濃度為1-60g/L的半乳糖基殼聚糖溶液和濃度為10-30g/L的海藻酸鹽溶液，調節兩種溶液pH在6.0-8.0之間；

3）將2）中配制的半乳糖基殼聚糖溶液與海藻酸鹽溶液按照體積比例為1:5-5:1的比例混合，室溫攪拌0.1-6h；

4）用3）中所述混合溶液通過銳孔擠出法、靜電液滴法、乳化法或旋轉盤法等形成液滴，滴入pH在5.0-6.9的二價鹽凝膠浴中，凝膠固化20-60分鐘，即制備成內部含有半乳糖基殼聚糖分子的包埋型水凝膠微球載體。

2.按照權利要求1所述的包埋型水凝膠微球載體，其特征在于：所述微球載體粒徑為100-1000微米。

3.按照權利要求1所述的包埋型水凝膠微球載體，其特征在于：包埋型水凝膠微球可繼續與聚陽離子反應，在微球表面絡合形成膜結構，即微膠囊；其中，聚陽離子包括下述任意一種或兩種以上：聚氨基酸類、聚胺類、殼聚糖。

4.按照權利要求3所述的包埋型水凝膠微膠囊，其特征在于：聚氨基酸類為聚賴氨酸、聚鳥氨酸、聚精氨酸、聚組氨酸；聚胺類為聚乙烯亞胺、聚亞甲基胍、聚N乙烯基己內酰胺、羧基-丙基-丙烯酰胺共聚物、DEAE-dextran、氨基聚乙二醇。

5.按照權利要求3所述的包埋型水凝膠微膠囊，其特征在于：所述的微膠囊可浸入有機金屬螯合劑溶液中，液化微膠囊內部海藻酸鹽凝膠；參與液化反應的有機金屬螯合劑溶液為40-70mmol/L的檸檬酸鈉或50-200mmol/L的EDTA溶液，微膠囊與有機金屬螯合劑溶液體積比范圍為1:1~1:40，反應1-60分鐘，取出用生理鹽水洗滌，此時得到內部液態核心的微膠囊。

6.按照權利要求1所述的包埋型水凝膠微球載體，其特征在于：所述二價鹽凝膠浴為質量濃度3.3g/L-33g/L二價金屬鈣、鋇或鋅離子溶液中的一種或二種以上。

7.按照權利要求1所述的包埋型水凝膠微球載體，其特征在于：所述水凝膠載體制備方法中的海藻酸鹽溶液包括必須含有的海藻酸鈉、海藻酸鉀中的一種或二種，不含有或非必須含有的海藻酸鈣、海藻酸鋇或海藻酸鋅中的一種或二種以上的海藻酸鹽，海藻酸鹽平均分子量在10kDa-10000kDa，海藻酸鹽中古洛糖醛酸單體摩爾含量在20-98%。

8.按照權利要求1所述的包埋型水凝膠微球載體，其特征在于：所用殼聚糖為易水溶的殼聚糖，包括分子量為1KDa-10KDa的低分子量殼聚糖、分子量為10KDa-800KDa水溶性殼聚糖、接枝親水基團的殼聚糖；殼聚糖脫乙酰度60-98%，形成的半乳糖基殼聚糖保持水溶性質。

9.一種權利要求1所述的包埋型水凝膠微球載體的應用，其特征在于：所述微球載體主要用于活細胞包埋，半乳糖基殼聚糖溶液與海藻酸鹽溶液充分混合后，混合液與需要包埋的活細胞混勻。

10.按照權利要求9所述的包埋型水凝膠微球載體的應用，其特征在于：所述活細胞為人或動物來源的離體的肝細胞，干細胞，干細胞分化的具有肝細胞功能的細胞，肝細胞系細胞，轉分化的具有肝細胞功能的細胞，內皮細胞，肝枯否氏細胞，肝星形細胞，成纖維細胞，骨髓間充質干細胞中一種或二種以上。