[發明專利]快速診斷試紙條

有效

• 申請號: 201510439727.4
• 申請日: 2015-07-23
• 公開（公告）號: CN105021595B
• 公開（公告）日: 2017-07-14
• 發明（設計）人: 朱成鋼;賈亮
• 申請（專利權）人: 杭州金溪生物技術有限公司
• 主分類號: G01N21/76
• 分類號: G01N21/76;G01N21/64;G01N33/558;G01N33/544
• 代理公司: 杭州中成專利事務所有限公司33212
• 代理人: 金祺

1.快速診斷試紙條，其特征是：包括PVC底板(1)、樣品墊(2)、玻璃纖維墊(3)、包被C線(6)以及T線(7)的硝酸纖維素膜(4)、吸水墊(5)；

在PVC底板(1)的上表面固定設置硝酸纖維素膜(4)，在硝酸纖維素膜(4)的兩側分別設有玻璃纖維墊(3)和吸水墊(5)；除玻璃纖維墊(3)的右端下表面與硝酸纖維素膜(4)的左端上表面固定相連之外，玻璃纖維墊(3)的其余下表面與PVC底板(1)的上表面固定相連；除吸水墊(5)的左端下表面與硝酸纖維素膜(4)的右端上表面固定相連之外，吸水墊(5)的其余下表面與PVC底板(1)的上表面固定相連；在玻璃纖維墊(3)的左側還設有樣品墊(2)，除樣品墊(2)的右端下表面與玻璃纖維墊(3)的左端上表面固定相連之外，樣品墊(2)的其余下表面與PVC底板(1)的上表面固定相連；

玻璃纖維墊(3)中包被有偶聯了特異性抗體Ⅰ的受體微球；

玻璃纖維墊(3)的制備方法為：

將偶聯了特異性抗體Ⅰ的受體微球用釋放緩沖液稀釋至濃度為80～100μg/ml，噴至玻璃纖維墊(3)上，用量為：1～5μl/cm；

所述釋放緩沖液為：在100ml的10～100mmol/L、pH 7.4的磷酸鹽緩沖液或硼酸鹽緩沖液中，加入10～40g蔗糖、3～10g海藻糖、0.5～1g的N，O-雙三甲硅基乙酰胺、0.2～0.5g慶大霉素；

硝酸纖維素膜(4)的制備方法為：

將偶聯了特異性抗體Ⅱ的供體微球用分析緩沖液稀釋至濃度為200～300μg/ml，然后噴至硝酸纖維素膜(4)的T線(7)位置；用量為：1～1.5μl/cm；

將偶聯了能與所述特異性抗體Ⅰ相結合的特異性抗體Ⅲ的供體微球用分析緩沖液稀釋至濃度為200～300μg/ml，然后噴至硝酸纖維素膜(4)的C線(6)位置；用量為：1～1.5μl/cm；

所述分析緩沖液為：在100ml的25mM、pH7.4的HEPES緩沖液中加入100～500mg的Dextran-500，加入NaCl直至其濃度為10～100mM、加入0.1～1g的BSA、0.01～0.05g的牛γ-球蛋白、0.001～0.5g的Tween-20、0.01～0.05g的Proclin-300；

所述特異性抗體Ⅰ和特異性抗體Ⅱ均能與待測蛋白特異性結合，且結合在待測蛋白質的不同表位。

2.根據權利要求1所述的快速診斷試紙條，其特征是：

特異性抗體Ⅰ和特異性抗體Ⅱ為以下任意一種：

兔、羊、雞來源的抗待測蛋白質的多抗，或者鼠、兔來源的抗待測蛋白質的單克隆抗體。

3.根據權利要求1或2所述的快速診斷試紙條，其特征是：

所述玻璃纖維墊(3)中：

受體微球為摻雜有銪配合物的聚苯乙烯微球；

所述特異性抗體Ⅰ為兔抗人心肌肌鈣蛋白cTnI抗體、鼠抗人C反應蛋白(CRP)單克隆抗體1；

硝酸纖維素膜(4)中：

特異性抗體Ⅱ為：鼠抗人心肌肌鈣蛋白cTnI單克隆抗體、鼠抗人C反應蛋白(CRP)單克隆抗體2；

特異性抗體Ⅲ為：羊抗兔IgG多克隆抗體、羊抗鼠IgG多克隆抗體；

所述供體微球為摻雜有酞菁的聚苯乙烯微球，在被680nm光激發后可釋放出單線態氧。

4.根據權利要求3所述的快速診斷試紙條，其特征是：

玻璃纖維墊(3)的制備方法中：將偶聯了兔抗人心肌肌鈣蛋白cTnI抗體的受體微球用釋放緩沖液混合稀釋到80μg/ml，噴至玻璃纖維墊(3)上，用量為1μl/cm；

硝酸纖維素膜(4)的制備方法中：將偶聯了鼠抗人心肌肌鈣蛋白cTnI單克隆抗體的供體微球用分析緩沖液稀釋到200μg/ml，噴至硝酸纖維素膜(4)的T線(7)位置，用量為1μl/cm；將偶聯了羊抗兔IgG多克隆抗體的供體微球用分析緩沖液稀釋到200μg/ml，噴至硝酸纖維素膜(4)的C線(6)位置，用量為1μl/cm。

5.根據權利要求4所述的快速診斷試紙條，其特征是：

所述釋放緩沖液為：在100ml的20mmol/L、pH 7.4的的磷酸鹽緩沖液中加入30g蔗糖、5g海藻糖、0.5g的N，O-雙三甲硅基乙酰胺、0.3g慶大霉素；

所述分析緩沖液的制備方法為：在100ml的25mM，pH7.4的HEPES緩沖液中加入200mg的Dextran-500，加入NaCl直至其濃度為50mM、加入0.5g的BSA、0.02g的牛γ-球蛋白、0.1g的Tween-20、0.01g的Proclin-300。