[發明專利]一種從南極磷蝦中提取及檢測己二酸二辛酯的方法

有效

• 申請號: 201510439198.8
• 申請日: 2015-07-23
• 公開（公告）號: CN105067735B
• 公開（公告）日: 2017-03-22
• 發明（設計）人: 馬善利;劉代成
• 申請（專利權）人: 山東師范大學
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/90;G01N30/06
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司37221
• 代理人: 董潔

技術領域

本發明涉及一種從南極磷蝦中提取及檢測己二酸二辛酯的方法。

背景技術

己二酸二辛酯(DOA)是一種聚氯乙烯的耐寒性增塑劑，其良好的耐寒功能使得南極磷蝦可以適應南極寒冷的氣候；DOA具有一定的耐熱、耐光和耐水性，尤其它的毒性很低，對皮膚和眼睛的刺激小，可用于制造冷凍食品的包裝薄膜、耐寒農用薄膜；此外DOA常用于塑料和橡膠制品加工和合成樹脂的增塑劑，是重要的化工中間體。

目前，通常己二酸二辛酸是由化學合成方法進行合成制得，比如由己二酸和正辛醇在酸催化下直接酯化制得，目前多以濃硫酸和對甲苯磺酸為催化劑，這些化學方法合成己二酸二辛酸方法普遍存在以下缺陷：產品質量差、對設備腐蝕嚴重、副反應多、后處理復雜、對環境污染嚴重(產生各種廢水、廢渣)等問題。

因此，針對以上問題亟需探索一種清潔提取己二酸二辛酯的方法。

南極磷蝦(學名Euphausiasuperba),是一種生活在南極洲水域的磷蝦，體形似小蝦，它們以微小的浮游植物作為食物，身長大約6厘米，重約2克，最長壽命可達6年。南極磷蝦是海洋哺乳動物、鳥類和魚類等南極生物主要的食物來源，是南極生態系統的關鍵物種。南極磷蝦含有豐富的蛋白質；磷蝦脂類所含的脂肪酸種類多，且多為不飽和脂肪酸；南極磷蝦還含有豐富的礦物質元素，包括鈣、磷、鐵、鋅、硒等。除此之外，磷蝦還含有多種活性物質，如酶類、蝦青素等。據統計，生活在南冰洋的南極洲水域的磷蝦的數量可以達到2×10⁹噸，可能的捕獲量估計在5×10⁶到7×10⁶噸。南極磷蝦的壽命一般為5-7年，2齡以后即成熟，體長最大可達到60nm以上。南極磷蝦有結群的習性，經常在200m左右的淺水層形成密集的群體。由于南極磷蝦具有生物量大、分布廣等特點，越來越多的研究者開始關注磷蝦的開發利用價值。

目前并沒有從南極磷蝦中提取己二酸二辛酯的相關報道，更沒有從南極磷蝦中提取及檢測己二酸二辛酯的方法。

發明內容

本發明的目的是提供一種操作簡單、準確、可靠的南極磷蝦己二酸二辛酯的提取及檢測方法。

本發明是通過以下技術方案實現的：

.一種從南極磷蝦中提取己二酸二辛酯的方法，包括以下步驟：

(1)以南極磷蝦為原料，采用乙醇為溶劑，在20～40℃、300～400W、20～40Hz的條件下超聲提取，過濾提取液，得濾液；

(2)將濾液蒸干，得到己二酸二辛酯的粗提物；

(3)利用柱層析對己二酸二辛脂的粗提物進行精制；

①制備硅膠層析柱；

②將己二酸二辛脂的粗提物加入到硅膠床上；

③洗脫：洗脫劑為二氯甲烷和甲醇的混合溶液，控制洗脫體積，收集900～1500mL的洗脫液，并對洗脫液進行濃縮、干燥，得到己二酸二辛脂。

一種從南極磷蝦中檢測己二酸二辛酯的方法，包括以下步驟：

(1)以南極磷蝦為原料，采用乙醇為溶劑，在20～40℃、300～400W、20～40Hz條件下超聲提取，過濾提取液，得濾液；

(2)將濾液蒸干，得到己二酸二辛酯的粗提物；

(3)利用柱層析對己二酸二辛脂的粗提物進行精制；

①制備硅膠層析柱；

②將己二酸二辛脂的粗提物加入到硅膠床上；

③洗脫：洗脫劑為二氯甲烷和甲醇的混合溶液，控制洗脫體積，分段收集洗脫液，收集若干次，并對洗脫液進行濃縮、干燥，得到若干份樣品液；

(4)初步檢測己二酸二辛脂：

取若干份樣品液進行TLC初步檢測，將若干份樣品液點于高效薄層硅膠板上，以體積比為二氯甲烷：甲醇＝3～4：1為展開劑，在展缸內展開，展距為8～10cm(優選為9cm)，展完后晾干展板，用茴香醛染色劑染色，然后置于100-105℃下烘烤6-10分鐘，根據顏色，選擇顏色變化為藍紫色的樣品液，即為己二酸二辛脂；

(5)采用氣相色譜-質譜檢進一步檢測己二酸二辛脂：

氣相色譜-質譜檢測條件：

①氣相色譜柱型號:DB-1，長度:30m，內徑:0.25mm，膜厚度:0.25μm，載氣:He，流速：1mL/min；

②進樣：進氣溫度:250℃，模式：分流，分流比：50:1，注射方式：手動；

③升溫程序：初始溫度50℃，以2℃/min升至60℃，再以30℃/min升至250℃，保持8min；

④進樣量：0.2μL，溶劑:EA；