[發明專利]一種從南極磷蝦中提取及檢測己二酸二辛酯的方法

有效

• 申請號: 201510439198.8
• 申請日: 2015-07-23
• 公開（公告）號: CN105067735B
• 公開（公告）日: 2017-03-22
• 發明（設計）人: 馬善利;劉代成
• 申請（專利權）人: 山東師范大學
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/90;G01N30/06
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司37221
• 代理人: 董潔

1.一種從南極磷蝦中提取己二酸二辛酯的方法，其特征是，包括以下步驟：

（1）以南極磷蝦為原料，采用乙醇為溶劑，在20～40℃、300～400W、20～40Hz的條件下超聲提取，過濾提取液，得濾液；

（2）將濾液蒸干，得到己二酸二辛酯的粗提物；

（3）利用柱層析對己二酸二辛脂的粗提物進行精制；

①制備硅膠層析柱；②將己二酸二辛脂的粗提物加入到硅膠床上；

③洗脫：洗脫劑為二氯甲烷和甲醇的混合溶液，控制洗脫體積，收集900～1500mL的洗脫液，并對洗脫液進行濃縮、干燥，得到己二酸二辛脂。

2.如權利要求1所述的方法，其特征是：步驟（1）中，南極磷蝦與乙醇的添加量比例為：1g:(5～10)mL。

3.如權利要求1所述的方法，其特征是：步驟（2）中，在20℃條件下將濾液蒸干，得到己二酸二辛酯的粗提物。

4.如權利要求1所述的方法，其特征是：步驟（3）中，所述二氯甲烷和甲醇體積比為8:1。

5.一種從南極磷蝦中檢測己二酸二辛酯的方法，其特征是，包括以下步驟：

（1）以南極磷蝦為原料，采用乙醇為溶劑，在20～40℃、300～400W、20～40Hz條件下超聲提取，過濾提取液，得濾液；

（2）將濾液蒸干，得到己二酸二辛酯的粗提物；

（3）利用柱層析對己二酸二辛脂的粗提物進行精制；

①制備硅膠層析柱；②將己二酸二辛脂的粗提物加入到硅膠床上；

③洗脫：洗脫劑為二氯甲烷和甲醇的混合溶液，控制洗脫體積，分段收集洗脫液，收集若干次，并對洗脫液進行濃縮、干燥，得到若干份樣品液；

（4）初步檢測己二酸二辛脂：

取若干份樣品液進行TLC初步檢測，將若干份樣品液點于高效薄層硅膠板上，以體積比為二氯甲烷：甲醇=3～4：1為展開劑，在展缸內展開，展距為8～10cm，展完后晾干展板，用茴香醛染色劑染色，然后置于100-105℃下烘烤6-10分鐘，根據顏色，選擇顏色變化為藍紫色的樣品液，即為己二酸二辛脂。

6.如權利要求5所述的方法，其特征是：步驟（3）中，控制洗脫體積，每250～300mL收集一次洗脫液，收集若干次，收集次數大于5次，并對洗脫液進行濃縮、干燥，得到若干份樣品液。

7.如權利要求6所述的方法，其特征是：控制洗脫體積，每300mL收集一次洗脫液，收集5次，并對洗脫液進行濃縮、干燥，得到5份樣品液。

8.如權利要求5所述的方法，其特征是：所述高效薄層硅膠板的型號為GF₂₅₄。

9.如權利要求5所述的方法，其特征是：還包括采用氣相色譜-質譜進一步檢測己二酸二辛脂，氣相色譜-質譜檢測條件：

①氣相色譜柱型號：DB-1，長度:30m，內徑:0.25mm，膜厚度:0.25μm，載氣:He，流速：1mL/min；

②進樣：進氣溫度:250℃，模式：分流，分流比：50:1，注射方式：手動；

③升溫程序：初始溫度50℃，以2℃/min升至60℃，再以30℃/min升至250℃，保持8min；

④進樣量：0.2μL，溶劑:EA；

⑤電離方式：電子轟擊源，四級桿溫度150℃，離子源溫度200℃；監測方式：全掃面，40-400amu單位；選擇離子掃描模式；電離能量：70eV；溶劑延遲：2.06min；

得到樣品質譜圖，確定顏色變化為藍紫色的樣品液為己二酸二辛酯，并計算己二酸二辛酯的含量。