[發明專利]一種植物復合免疫制品生產工藝

在審

• 申請號: 201510439088.1
• 申請日: 2015-07-24
• 公開（公告）號: CN105145637A
• 公開（公告）日: 2015-12-16
• 發明（設計）人: 李素影
• 申請（專利權）人: 李素影
• 主分類號: A01N63/02
• 分類號: A01N63/02;A01P21/00;A01P3/00;C12N7/00;C12N7/08
• 代理公司: 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙) 11350
• 代理人: 湯東鳳

1.一種植物復合免疫制品生產工藝，其特征在于，步驟如下：

第一步，收集病毒源，預先在田間采集該種發病植物上的病菌或病毒，進行分離提純；

第二步，建立植物病專用毒園，接種上述病菌或病毒到專用植物病毒園中，讓該種植物大量感染病菌和病毒；

第三步，在病毒園植物發病進入高發期，采收病變組織，用100—200目普通粉碎機進行粉碎，送入發酵池，攪拌均勻，進行發酵減毒；在發酵過程中，發酵溫度要達到36℃以上，時間為5—7天；

第四步，待發酵完成后，送入150—250目分離機加入等量的水進行分離；為提高利用率，分離后的殘渣繼續加入同等量的水繼續攪拌，進行第二次分離；把兩次分離出來的含有病菌或病毒的混合液體通過中空纖維系統濃縮到原濃度的三分之一后裝入商品瓶中，即成為植物復合免疫制品。

2.如權利要求1所述的植物復合免疫制品生產工藝，其特征在于，裝瓶后的病毒疫苗可進行二次紫外線滅毒，制成植物復合免疫制品。

3.如權利要求1所述的植物復合免疫制品生產工藝，其特征在于，第一步中的提純方法為：

采集的病毒源組織在搗碎機搗碎，加入緩沖液（1∶2W/V）中，再加入0.01mol銅試劑和0.5％巰基乙醇，勻漿3-5分鐘；再加冷卻氯仿（1∶1W/V），變速研磨1分鐘；初步離心，4℃靜置15分鐘，留上層水相，得初提液；

初提液中加4％聚乙二醇和0.25mol氯化鈉，攪拌1小時；離心10000g，4℃溫度下30分鐘，留沉淀；用1ml/100ml緩沖液緩沖液再懸浮沉淀，攪拌2小時；離心3000g，4℃靜置10分鐘，留上清液；再離心10000g，4℃靜置30分鐘，留沉淀；再用濃度為1ml/100ml緩沖液懸浮，制成再提液；

最后離心3000g，4℃靜置10分鐘，留上清液，即為提純后的病毒懸浮液，4℃保存。

4.如權利要求1-3所述的植物復合免疫制品生產工藝，其特征在于，適合果樹、蔬菜、糧食作物、林木、花卉等所有植物品種的復合免疫制品的生產。

5.如權利要求1-3所述的植物復合免疫制品生產工藝，其特征在于，適用于葡萄中的白腐病、黑痘病、霜霉病、或炭疽病的復合免疫制品生產。