[發(fā)明專利]鑒別五味子中摻雜南五味子的薄層色譜方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510438772.8
• 申請(qǐng)日: 2015-07-23
• 公開（公告）號(hào): CN104991032A
• 公開（公告）日: 2015-10-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳有根;李錚;傅欣彤;郭洪祝
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京市藥品檢驗(yàn)所
• 主分類號(hào): G01N30/90
• 分類號(hào): G01N30/90
• 代理公司: 北京志霖恒遠(yuǎn)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11435
• 代理人: 孟阿妮;郭棟梁

1.鑒別五味子中摻雜南五味子的薄層色譜方法，其包括以下步驟：

1)精密稱取安五脂素對(duì)照品，置于適當(dāng)?shù)娜萜髦校右宜嵋阴ト芙庵瞥蛇m當(dāng)濃度的對(duì)照品溶液；

2)取五味子供試品粗粉適量，置于具塞錐形瓶中，加溶劑適量，超聲處理20～60分鐘(例如40min)，濾過，將濾液在水浴上蒸干，殘?jiān)舆m量甲醇使溶解，離心，取上清液蒸干，殘?jiān)右宜嵋阴?ml使溶解，作為供試品溶液；

3)用定量毛細(xì)管分別吸取上述1)制得的對(duì)照品溶液和2)制得的供試品溶液適量，依次點(diǎn)樣于同一硅膠薄層板GF₂₅₄的同一水平線不同位置上；

4)取氯仿和丙酮，按照體積比60：1混合均勻，得到展開劑；將適量展開劑置干燥潔凈的雙槽薄層色譜展開缸的第一個(gè)槽中；

5)將步驟3)的硅膠薄層板GF₂₅₄，置于步驟4)的雙槽薄層色譜展開缸第二個(gè)槽中，密閉缸蓋，預(yù)飽和10-30分鐘后，將上述雙槽薄層色譜展開缸第一個(gè)槽中的展開劑轉(zhuǎn)移到放有硅膠薄層板GF₂₅₄的第二個(gè)槽中，進(jìn)行展開，展距10cm，結(jié)束展開，取出薄層板，晾干；

6)結(jié)果判斷：

61)取步驟5)晾干的硅膠薄層板GF₂₅₄，置254nm波長紫外燈下檢視，如果在與安五脂素對(duì)照品相同Rf值位置上無相同的暗斑，且在Rf＝0.67～0.71處顯示暗斑，則該五味子中未摻雜南五味子；如果在與安五脂素對(duì)照品相同Rf值位置上有相同的暗斑，且在Rf＝0.67～0.71處顯示暗斑，則該供試品是摻雜有南五味子的五味子藥材；和/或

62)取5％磷鉬酸顯色劑，將其均勻噴至步驟5)的硅膠薄層板GF₂₅₄上，105℃加熱至斑點(diǎn)清晰，取出，放涼，日光下檢視，如果在與安五脂素對(duì)照品相同Rf值位置上無相同顏色的斑點(diǎn)，且在Rf＝0.67～0.71處顯示斑點(diǎn)，則該五味子中未摻雜南五味子；如果在與安五脂素對(duì)照品相同Rf值位置上有相同顏色的斑點(diǎn)，且在Rf＝0.67～0.71處顯示斑點(diǎn)，則該供試品是摻雜有南五味子的五味子藥材。

2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，所述步驟1)中所述適當(dāng)濃度的對(duì)照品溶液，其濃度可以是每1ml含對(duì)照品0.5～4mg，例如每1ml含對(duì)照品0.5～2mg，例如每1ml含對(duì)照品1mg。

3.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，所述步驟2)中所述藥材粗粉可以是過20～100目篩(例如過50～80目篩，例如過60目篩)的粉末；所述粗粉適量，可以是0.5～2g，例如1g。

4.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，所述步驟2)中，所述溶劑可以是石油醚(60～90℃)、石油醚(30～60℃)、正己烷、環(huán)己烷、氯仿、二氯甲烷。

5.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，所述步驟2)中，所述溶劑適量可以是5～20ml，例如10ml。

6.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，所述步驟3)中所述取對(duì)照品溶液或供試品溶液適量，可以是1～10μl(例如2μl)。

7.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，所述硅膠薄層板GF₂₅₄。

8.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，所述步驟4)中所述適量展開劑，其體積可以是10～30ml(例如20ml)。

9.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，所述展開缸，其規(guī)格可以是10cm(長)×10cm(寬)、10cm(長)×20cm(寬)、20cm(長)×10cm(寬)，厚度不限。

10.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其包括以下步驟：

1)對(duì)照品溶液的制備：精密稱取安五脂素對(duì)照品，置于適當(dāng)?shù)娜萜髦校右宜嵋阴ト芙庵瞥蛇m當(dāng)濃度的對(duì)照品溶液，備用；

2)藥材供試品溶液制備：

用高速萬能粉碎機(jī)對(duì)干燥的五味子供試品粉碎，過60目篩得藥材粉末；

精密稱取供試品粉末適量，置于具塞錐形瓶中，加溶劑適量，超聲處理20～60分鐘(例如40min)，濾過，將濾液在水浴上蒸干，殘?jiān)舆m量甲醇使溶解，離心，取上清液蒸干，殘?jiān)右宜嵋阴?ml使溶解，作為供試品溶液；

3)用定量毛細(xì)管分別吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各2～10μl，依次點(diǎn)樣于同一硅膠薄層板GF₂₅₄的同一水平線不同位置上；

4)取氯仿和丙酮，按照體積比60：1混合均勻，得到展開劑；將展開劑置干燥潔凈的雙槽薄層色譜展開缸的第一個(gè)槽中；

5)將步驟3)的硅膠薄層板GF₂₅₄，置于步驟4)的雙槽薄層色譜展開缸第二個(gè)槽中，密閉缸蓋，預(yù)飽和10-30分鐘后，將上述雙槽薄層色譜展開缸第一個(gè)槽中的展開劑轉(zhuǎn)移到放有硅膠薄層板GF₂₅₄的第二個(gè)槽中，進(jìn)行展開，展距10cm，結(jié)束展開，取出薄層板，晾干；

配制顯色劑：取磷鉬酸5g，置于100ml量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度，配制成5％磷鉬酸顯色劑，置于噴霧器中備用；

6)結(jié)果判斷：

61)取步驟5)晾干的硅膠薄層板GF₂₅₄，置254nm波長紫外燈下檢視，如果在與安五脂素對(duì)照品相同Rf值位置上無相同的暗斑，且在Rf＝0.67～0.71處顯示暗斑，則該五味子中未摻雜南五味子；如果在與安五脂素對(duì)照品相同Rf值位置上有相同的暗斑，且在Rf＝0.67～0.71處顯示暗斑，則該供試品是摻雜有南五味子的五味子藥材；和/或

62)將顯色劑均勻噴至步驟5)的硅膠薄層板GF₂₅₄上，105℃加熱至斑點(diǎn)清晰，取出，放涼；日光下檢視，如果在與安五脂素對(duì)照品相同Rf值位置上無相同顏色的斑點(diǎn)，且在Rf＝0.67～0.71處顯示斑點(diǎn)，則該五味子中未摻雜南五味子；如果在與安五脂素對(duì)照品相同Rf值位置上有相同顏色的斑點(diǎn)，且在Rf＝0.67～0.71處顯示斑點(diǎn)，則該供試品是摻雜有南五味子的五味子藥材。