[發(fā)明專利]一種鑒別鯉魚品種的分子標(biāo)記及利用其進(jìn)行鑒別的方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201510436129.1 | 申請日： | 2015-07-22 |
| 公開（公告）號： | CN104946787A | 公開（公告）日： | 2015-09-30 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 董在杰;曲疆奇;朱文彬;王蘭梅 | 申請（專利權(quán)）人： | 中國水產(chǎn)科學(xué)研究院淡水漁業(yè)研究中心 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 無錫市大為專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙) 32104 | 代理人： | 殷紅梅;張仕婷 |
| 地址： | 214081 江蘇省*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 鑒別 鯉魚 品種 分子 標(biāo)記 利用 進(jìn)行 方法 | ||
1.一種鑒別鯉魚品種的分子標(biāo)記，其特征是采用的引物對為：核苷酸序列為5’-3’；固定引物序列為：5’-GCCGACTTGAAAATGG-3’，隨機(jī)引物序列為：5’-GGAACCAAACACATGAAGA-3’。
2.采用權(quán)利要求1所述分子標(biāo)記進(jìn)行鯉魚品種鑒別的方法，其特征是步驟為：
(1)設(shè)計TRAP分子標(biāo)記引物：設(shè)計固定引物序列和隨機(jī)引物序列；
(2)PCR反應(yīng)：總體積為15μL，其中Mg2+1.5mmol/L、dNTPs?0.35mmol/L、隨機(jī)引物6pmol/L、固定引物10pmol/L、含DNA模板60ng、Taq?DNA聚合酶1.0U，用滅菌雙蒸餾水補(bǔ)足體積；
PCR反應(yīng)條件為：94℃4min；94℃45s，35℃45s，72℃1min，5個循環(huán)；94℃45s，53℃45s，72℃1min，35個循環(huán)；72℃10min；
(3)電泳：對步驟(3)的所得PCR產(chǎn)物用質(zhì)量濃度為8.0％的聚丙烯酰胺凝膠進(jìn)行電泳分離，銀染法染色后，拍照記錄電泳結(jié)果；
(4)結(jié)果觀察：針對特定鯉魚品種電泳后樣品出現(xiàn)電泳條帶，用于鯉品種鑒別、保種和分子輔助選擇育種。
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