[發明專利]一種超濾處理黃霉素發酵液的方法有效
| 申請號: | 201510433960.1 | 申請日: | 2015-07-22 |
| 公開(公告)號: | CN105037451B | 公開(公告)日: | 2017-10-27 |
| 發明(設計)人: | 陳斌;李蓉;俱名揚;郭燕彬;楊凱迪;馬曉迅 | 申請(專利權)人: | 西北大學 |
| 主分類號: | C07H13/12 | 分類號: | C07H13/12;C07H1/06 |
| 代理公司: | 西安通大專利代理有限責任公司61200 | 代理人: | 王霞 |
| 地址: | 710069 *** | 國省代碼: | 陜西;61 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 超濾 處理 霉素 發酵 方法 | ||
1.一種超濾處理黃霉素發酵液的方法,其特征在于,包括以下步驟:
1)將黃霉素發酵液用去離子水連續超濾1h,棄去透析液;
2)將步驟1)超濾截留的黃霉素發酵液用含有膠束調節劑的水溶液繼續超濾1h,收集富集黃霉素的透析液;
所述的膠束調節劑為甲酰胺或尿素;
超濾所用超濾膜的材質為聚醚砜、聚砜、聚丙烯腈或聚酰胺。
2.根據權利要求1所述的一種超濾處理黃霉素發酵液的方法,其特征在于,超濾所用超濾膜的截留分子量為3000~50000。
3.根據權利要求1所述的一種超濾處理黃霉素發酵液的方法,其特征在于,在步驟1)前還包括對黃霉素發酵液進行預處理,具體操作為:將黃霉素發酵液于4℃冷藏過夜,然后在8000r/min的條件下離心10min。
4.根據權利要求1所述的一種超濾處理黃霉素發酵液的方法,其特征在于,在步驟2)后還包括對富集黃霉素的透析液采用色譜法進行精制的步驟。
5.根據權利要求4所述的一種超濾處理黃霉素發酵液的方法,其特征在于,精制采用正相色譜法、反相色譜法或離子交換色譜法。
6.根據權利要求5所述的一種超濾處理黃霉素發酵液的方法,其特征在于,正相色譜的填料為硅膠,其粒徑為20~150μm;
離子交換色譜填料的骨架為聚甲基丙烯酸酯類,其功能基團為-CH2-CH2-NH-(C2H5)2,粒徑為20~75μm。
7.根據權利要求5所述的一種超濾處理黃霉素發酵液的方法,其特征在于,反相色譜法具體操作為:
將富集黃霉素的透析液的pH值調節至3.0~4.5,以50~250cm/hr的流速泵入裝填有反相色譜填料的層析柱,以相同的流速,選取pH值為8.30的20%甲醇溶液為A流動相,以純甲醇為B流動相,按照0~40%B流動相線性梯度洗脫40min,再用40%B流動相等梯度洗脫至黃霉素A組分完全解吸,合并高純度黃霉素A組分,去除溶劑后冷凍干燥,得到精制后的黃霉素A組分產品。
8.根據權利要求7所述的一種超濾處理黃霉素發酵液的方法,其特征在于,所用的反相色譜填料孔徑為粒徑為20~75μm;反相色譜填料為硅膠改性的C8、C18填料,或者為聚合物基質的色譜填料;
聚合物基質為苯乙烯-二乙烯苯聚合物或聚甲基丙烯酸酯類聚合物。
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