[發明專利]人類CYP2C19基因多態性檢測特異性引物和試劑盒

有效

• 申請號: 201510428682.0
• 申請日: 2015-07-20
• 公開（公告）號: CN104988149A
• 公開（公告）日: 2015-10-21
• 發明（設計）人: 周鵬飛;蔡從利;張喆;王雯靜;薛偉滄;李麗瓊
• 申請（專利權）人: 武漢友芝友醫療科技有限公司
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12Q1/68
• 代理公司: 北京市百倫律師事務所 11433
• 代理人: 周紅力

1.一種人類CYP2C19基因多態性檢測特異性引物，其特征在于，所述引物的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:1-9所示。

2.一種人類CYP2C19基因多態性檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒含有權利要求1所述的特異性引物。

3.根據權利要求2所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括3組特異性探針序列，其中第1組特異性探針序列的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:10與SEQ?ID?NO:11所示；第2組特異性探針序列的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:12與SEQ?ID?NO:13所示；第3組特異性探針序列的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:14與SEQ?ID?NO:15所示，且所述熒光定量PCR探針的5’端有FAM或VIC修飾，3’端有NFQ-MGB修飾。

4.根據權利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括內標系統，所述內標系統包含內標引物和內標探針，所述內標引物的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.16和SEQ?ID?NO.17所示，所述內標探針序列如SEQ?ID?NO.18所示。

5.根據權利要求4所述的試劑盒，其特征在于，所述內標探針的5’端有ROX修飾，3’端有BHQ2修飾。

6.根據權利要求2-5中任意一項所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒含有陽性對照液和空白對照液，所述陽性對照液中含有6種質粒DNA，所述6種質粒DNA分別含有2種不同的CYP2C19*2等位基因、2種不同的CYP2C19*3等位基因和2種不同的CYP2C19*17等位基因，所述空白對照為Tris-HCl緩沖液。

7.根據權利要求6所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括Taq酶和UNG酶。

8.利用權利要求1所述的特異性引物或權利要求2-7中任意一項所述的試劑盒檢測人類CYP2C19基因多態性的方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）獲得待測樣品基因組DNA；

（2）利用特異性引物、特異性探針和內標系統進行熒光定量PCR反應。

9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于，所述熒光定量PCR反應的體系為：

10.根據權利要求8或9所述的方法，其特征在于，所述熒光定量PCR反應的程序為：37℃處理10分鐘，95℃預變性5分鐘，預變性后按照以下程序進行40個循環：95℃15秒，60℃1分鐘。