[發(fā)明專(zhuān)利]一種用于治療軟骨疾病的脂質(zhì)體遞送系統(tǒng)及其制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510414350.7
• 申請(qǐng)日: 2015-07-15
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN105078889B
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-10-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 魏壘;衛(wèi)小春;王少偉;張戈;孫曉娟
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 魏壘;衛(wèi)小春;王少偉;張戈;孫曉娟
• 主分類(lèi)號(hào): A61K9/127
• 分類(lèi)號(hào): A61K9/127;A61K48/00;A61K31/713;A61P19/04
• 代理公司: 太原晉科知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 14110
• 代理人: 王瑞玲

1.一種軟骨siRNA脂質(zhì)體遞送組合物，包括脂質(zhì)體、脂質(zhì)體修飾物和小核酸藥物，其特征在于：所述脂質(zhì)體為磷脂酰膽堿DPPC、膽固醇、Dlin-KC2-DMA；所述脂質(zhì)體修飾物為聚乙二醇脂質(zhì)共軛物C16聚乙二醇神經(jīng)酰胺，所述小核酸藥物為Ihh siRNA；所述磷脂酰膽堿DPPC濃度為35mg/ml，占脂質(zhì)體和脂質(zhì)體修飾物的質(zhì)量百分比為11.72%；膽固醇濃度為9.5mg/ml，占脂質(zhì)體和脂質(zhì)體修飾物的質(zhì)量百分比為23.85%；聚乙二醇脂質(zhì)共軛物C16聚乙二醇神經(jīng)酰胺濃度為50mg/ml，占脂質(zhì)體和脂質(zhì)體修飾物的質(zhì)量百分比為16.74%；Dlin-KC2-DMA的濃度為28.5mg/ml，占脂質(zhì)體和脂質(zhì)體修飾物的質(zhì)量百分比為47.69%；

制備方法包括以下步驟：

（1）混合脂質(zhì)體：將2μl磷脂酰膽堿DPPC、15μl膽固醇、2μl聚乙二醇脂質(zhì)共軛物C16聚乙二醇神經(jīng)酰胺、10μl的Dlin-KC2-DMA混合，然后加入乙醇將脂質(zhì)體溶解，形成A液；

（2）將20μM、10μl的Ihh siRNA加入55μl的檸檬酸鹽緩沖液，形成B液；

（3）將A液加入B液中混合均勻，形成AB混合液；

（4）在A(yíng)B混合液中加入400μl的PBS緩沖液洗滌，然后在超濾離心管中12000r離心5min；

（5）用PBS重復(fù)洗滌離心3次，離心后所獲得的80-100μl液體即為軟骨siRNA脂質(zhì)體遞送組合物。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種軟骨siRNA脂質(zhì)體遞送組合物，其特征在于：所述小核酸藥物的靶序列為SEQ ID NO：2，即Ihh siRNA的第1708-1734位堿基序列。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種軟骨siRNA脂質(zhì)體遞送組合物，其特征在于：所述檸檬酸鹽緩沖液的濃度為50mM，pH為4。