[發(fā)明專(zhuān)利]能抑制豬流感病毒的shRNA轉(zhuǎn)基因重組質(zhì)粒及其應(yīng)用有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201510412627.2 | 申請(qǐng)日: | 2015-07-14 |
| 公開(kāi)(公告)號(hào): | CN105002179B | 公開(kāi)(公告)日: | 2018-07-06 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 孟慶文;王偉;陳洪巖 | 申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人: | 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所 |
| 主分類(lèi)號(hào): | C12N15/113 | 分類(lèi)號(hào): | C12N15/113;C12N15/79;C12N5/10;A61K48/00;A61P31/16 |
| 代理公司: | 北京路浩知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君 |
| 地址: | 150001 黑龍*** | 國(guó)省代碼: | 黑龍江;23 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 質(zhì)粒 豬流感病毒 重組質(zhì)粒 轉(zhuǎn)基因 豬流感病毒感染 亞型流感病毒 抑制流感病毒 轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系 流感病毒PA 慢病毒載體 轉(zhuǎn)基因技術(shù) 保守區(qū)域 表達(dá)基因 肌肉注射 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù) 體外培育 血液注射 轉(zhuǎn)基因豬 抗流感 豬流感 仔豬 靶向 靜脈 應(yīng)用 復(fù)制 篩選 轉(zhuǎn)入 抵抗 感染 研究 防治 積累 發(fā)現(xiàn) | ||
1.一種能抑制豬流感病毒復(fù)制與感染的shRNA,其特征在于,所述shRNA是以豬流感病毒PB2,以及PA、PB1和NP為靶基因,編碼所述shRNA的核苷酸序列為:
2.一種能抑制豬流感病毒的shRNA轉(zhuǎn)基因重組質(zhì)粒,其特征在于,所述質(zhì)粒含有以豬流感病毒PB2為靶基因的shRNA表達(dá)盒,以及豬流感病毒PA、PB1和NP為靶基因的shRNA表達(dá)盒;
其中,以豬流感病毒PA為靶基因的shRNA表達(dá)盒在h7SK啟動(dòng)子控制下,以豬流感病毒PB1為靶基因的shRNA表達(dá)盒在hH1啟動(dòng)子控制下,以豬流感病毒PB2為靶基因的shRNA表達(dá)盒在hU6啟動(dòng)子控制下,以豬流感病毒NP為靶基因的shRNA表達(dá)盒在mU6啟動(dòng)子控制下,且各表達(dá)盒呈串聯(lián)狀態(tài)。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的重組質(zhì)粒,其特征在于,出發(fā)質(zhì)粒為pGenesil-EGFP。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的重組質(zhì)粒,其特征在于,出發(fā)質(zhì)粒中含有嘌呤霉素抗性基因。
5.含有編碼權(quán)利要求1所述shRNA的DNA的轉(zhuǎn)基因細(xì)胞。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的轉(zhuǎn)基因細(xì)胞,其特征在于,所述細(xì)胞來(lái)自人、哺乳動(dòng)物和/或禽類(lèi)。
7.含有權(quán)利要求2-4任一項(xiàng)所述重組質(zhì)粒的宿主細(xì)胞。
8.權(quán)利要求2-4任一項(xiàng)所述重組質(zhì)粒在制備抑制豬流感病毒復(fù)制與感染的藥物中的應(yīng)用。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用,其特征在于,所述藥物為靜脈注射劑或肌肉注射劑。
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