[發明專利]一種利用龍腦樟段木培育牛樟芝子實體的方法

有效

• 申請號: 201510403880.1
• 申請日: 2015-07-08
• 公開（公告）號: CN105145112B
• 公開（公告）日: 2017-08-25
• 發明（設計）人: 范春娟
• 申請（專利權）人: 范春娟
• 主分類號: A01G1/04
• 分類號: A01G1/04
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司33200
• 代理人: 邱啟旺

技術領域

本發明涉及一種牛樟芝子實體的培育方法，尤其涉及一種以龍腦樟段木為基質培育牛樟芝子實體的方法。

背景技術

牛樟芝(Antrodia camphorata)又名牛樟菇，為中國臺灣地區特有真菌，是迄今牛樟樹上發現的唯一木腐菌。其宿主專一性較強，僅生長于牛樟樹上，而牛樟樹為中國臺灣地區特有的保育類樹種，數量稀少。牛樟芝含有許多的生理活性成分，如多糖體、三萜類化合物、超氧歧化酶、腺苷、蛋白質(含免疫蛋白)、維生素、微量元素、核酸、凝集素、氨基酸、甾醇類、纖維素、血壓穩定物質等。牛樟芝的有效成分中以三萜類化合物為最特別，高達200種以上，是其他菌類無法比擬的，使牛樟芝具有顯著的抗癌、保肝等功效。牛樟芝子實體氣芳香味辛苦、平，有祛風行氣、化淤活血、溫中消結、解毒消腫、鎮靜止痛、抗菌、抗病毒、抗腫瘤、提升機體免疫力之效；對于治療胃腸疼痛、腹瀉嘔吐、食物中毒、毒蕈中毒、糖尿病、酒精肝、脂肪肝、肝硬化、肝癌等更是有獨特功能。

目前關于牛樟芝的人工培育方法，主要有液體深層發酵法、太空包法、皿式培養法及牛樟木段木培育法。以上方法各有其缺點，液體深層發酵法雖然周期短，但是得到的是菌絲體的形式，牛樟芝特有的三萜類化合物不能合成；太空包法及皿式培養法僅有含量極低的三萜類化合物；牛樟芝段木培育法能得到與野生牛樟芝完全一致的子實體，但是需要以牛樟木為基質，存在資源稀少、成本較高的缺點。

龍腦樟樹(Cirmamonun camphora)原產于印尼蘇門答臘島，1988年湖南首次發現有分布，現在已發展龍腦樟林木超過4萬畝；隨后江西也發展近萬畝。

迄今為止，還未有以龍腦樟段木為基質進行牛樟芝栽培的報道。

發明內容

本發明目的是針對現有技術的不足，提供一種利用龍腦樟段木培育牛樟芝子實體的方法，本發明擴大了牛樟芝宿主范圍，保護了珍稀的牛樟樹資源，子實體與野生牛樟芝功效成分一致，三萜總量不少于80mg/100g，總多糖不少于50mg/100g，促進了牛樟芝產業的發展。

本發明的目的是通過以下技術方案來實現的：一種利用龍腦樟段木培育牛樟芝子實體的方法，該方法包括以下步驟：

(1)將牛樟芝菌種接種到斜面培養基中，于20-30℃培養10-30d，制得斜面菌種；所述斜面培養基為：龍腦樟提取液10-20mL/L，蔗糖10-30g/L，MgSO₄·7H₂O 0.5-2g/L，K₂HPO₄·3H₂O 1-5g/L，維生素B₁5-10mg/L，瓊脂15-20g/L，用馬鈴薯提取液補足體積至1L，pH為6.0-7.0；其中，所述龍腦樟提取液為：龍腦樟木料粉碎，過40目篩，得龍腦樟木料粉，按照龍腦樟木料粉和水的質量比1:200加水，常壓煮沸2小時，過濾得龍腦樟提取液；所述馬鈴薯提取液為：馬鈴薯100-300g去皮切塊，得馬鈴薯塊，按照馬鈴薯塊和水的質量比1-3:10加水，常壓煮沸30min，過濾得馬鈴薯提取液。

(2)用無菌水沖洗步驟1制得的斜面菌種的孢子，制成孢子懸液，并用無菌水將孢子懸液的OD₆₀₀調整為1.5；

(3)將步驟2制成的孢子懸液按5％-10％(v/v)的比例接種到液體菌種培養基，于25-35℃、100-200r/min條件下，避光培養5-25d，制得液體菌種；所述液體菌種培養基為：龍腦樟提取液10-20mL/L，蔗糖10-30g/L，MgSO₄·7H₂O0.5-2g/L，K₂HPO₄·3H₂O 1-5g/L，維生素B₁5-10mg/L，用馬鈴薯提取液補足體積至1L，pH為6.0-7.0；

(4)將龍腦樟木料分解成5×10×20cm的段木，用水浸泡12-48h，然后121℃滅菌20-60min。冷卻后，將步驟3制得的液體菌種接種到龍腦樟段木上。

(5)于25-35℃、濕度70％-90％條件下，避光培養1-12個月。

(6)鏟掉龍腦樟木段木表面的牛樟芝菌絲體形成的菌皮，于20-40℃、濕度70％-90％，避光培養12-36個月，即可得到牛樟芝子實體。

進一步地，采收后的龍腦樟段木，噴水濕潤后繼續培養，重復步驟(5)和(6)，可再收獲1-2次牛樟芝子實體。