[發明專利]一種向日葵黃萎病的兩種輪枝病菌的多重DPO?PCR檢測試劑盒及其應用有效
| 申請號： | 201510380096.3 | 申請日： | 2015-07-01 |
| 公開（公告）號： | CN104946637B | 公開（公告）日： | 2018-01-02 |
| 發明（設計）人： | 乾義柯;魏霜;張娜;梁巧玲;陳衛民;陸平;易建平;賽鐵爾汗;劉中勇 | 申請（專利權）人： | 中華人民共和國伊犁出入境檢驗檢疫局;伊犁職業技術學院 |
| 主分類號： | C12N15/11 | 分類號： | C12N15/11;C12Q1/68;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 北京紀凱知識產權代理有限公司11245 | 代理人： | 關暢,白艷 |
| 地址： | 835000 新疆維吾爾自治*** | 國省代碼： | 新疆;65 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 向日葵 黃萎病 兩種輪枝 病菌 多重 dpo pcr 檢測 試劑盒 及其 應用 | ||
1.一種檢測或輔助檢測待測菌株是黑白輪枝菌還是大麗輪枝菌的引物組，由引物1、引物2、引物3和引物4組成：
所述引物1為SEQ ID No.1所示的單鏈DNA分子；
所述引物2為SEQ ID No.2所示的單鏈DNA分子；
所述引物3為SEQ ID No.3所示的單鏈DNA分子；
所述引物4為SEQ ID No.4所示的單鏈DNA分子。
2.一種檢測或輔助檢測待測菌株是黑白輪枝菌還是大麗輪枝菌的PCR試劑，包括權利要求1所述的引物組。
3.根據權利要求2所述的PCR試劑，其特征在于：所述引物1、所述引物2、所述引物3和所述引物4在所述PCR試劑中的終濃度均為0.4 μmol/L。
4.一種檢測或輔助檢測待測菌株是黑白輪枝菌還是大麗輪枝菌的試劑盒，包括權利要求1所述的引物組或權利要求2或3所述的PCR試劑。
5.權利要求1所述的引物組或權利要求2或3所述的PCR試劑或權利要求4所述的試劑盒在檢測或輔助檢測待測菌株是黑白輪枝菌還是大麗輪枝菌中的應用。
6.權利要求1所述的引物組或權利要求2或3所述的PCR試劑或權利要求4所述的試劑盒在區分或輔助區分黑白輪枝菌和大麗輪枝菌中的應用。
7.一種檢測或輔助檢測待測菌株是黑白輪枝菌還是大麗輪枝菌的方法，包括如下步驟：
（1）用權利要求1所述引物組對待測菌株進行PCR擴增，得到PCR擴增產物；
（2）檢測所述PCR擴增產物的大小；
若所述PCR擴增產物大小為151bp的片段，則待測菌株為或候選為黑白輪枝菌；
若所述PCR擴增產物大小為225bp的片段，則待測菌株為或候選為大麗輪枝菌。
8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于：所述PCR擴增的模板為待測菌株的基因組DNA。
9.根據權利要求7或8所述的方法，其特征在于：所述PCR擴增的退火溫度為45-65 ℃。
10.權利要求7-9中任一所述的方法在檢測或輔助檢測測待測菌株是黑白輪枝菌還是大麗輪枝菌中的應用。
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