[發明專利]一種谷物粉狀食品中稻米成分的HDA檢測方法及試劑盒

在審

• 申請號: 201510380048.4
• 申請日: 2015-06-27
• 公開（公告）號: CN104894287A
• 公開（公告）日: 2015-09-09
• 發明（設計）人: 張帆濤;謝建坤;羅向東;周毅
• 申請（專利權）人: 江西師范大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 南昌市平凡知識產權代理事務所 36122
• 代理人: 夏材祥

1.一種谷物粉狀食品中稻米成分的HDA檢測方法，其特征在于：

（1）從待測樣品中提取DNA作為檢測的模板；

（2）利用HDA引物對或者含引物對的試劑盒中的引物對，進行HDA反應，得到擴增產物；

（3）檢測擴增產物，并作出判斷。

2.根據權利要求1所述的一種谷物粉狀食品中稻米成分的HDA檢測方法，其特征在于，所述引物對序列為：

SEQ?ID?No：1：5’-AGCACCTTCTTGTTACCGCG-3’；

SEQ?ID?No：2：5’-GAACCGCATGTTGTAAACGA-3’；

所述引物對由上海生工生物工程有限公司合成。

3.根據權利要求1所述的一種谷物粉狀食品中稻米成分的HDA檢測方法，其特征在于，所述的HDA反應體系為：5?μL的10×緩沖液，0.2?μmol的ATP，0.1?μmol的dNTPs，10?U?Bst?polymerase，5?μg?RecA蛋白，0.2?μg?UvrD?helicase，25?μM海藻糖，2?μL的10?μmol/L的上游引物，2?μL的10?μmol/L的下游引物，2?μL的樣品基因組DNA，用ddH₂O補至50?μL。

4.根據權利要求1所述的一種谷物粉狀食品中稻米成分的HDA檢測方法，其特征在于，所述的HDA反應方法為：將反應體系放入60-70^oC恒溫金屬浴中恒溫擴增2h。

5.根據權利要求1所述的一種谷物粉狀食品中稻米成分的HDA檢測方法，其特征在于：所述的檢測擴增產物并作出判斷是采用瓊脂糖凝膠電泳的方法進行，出現205?bp左右的特異性擴增條帶即判斷為檢測出稻米成分。

6.一種谷物粉狀食品中稻米成分的HDA檢測試劑盒，其特征在于：所述用于從谷物粉狀食品中檢測稻米成分的試劑盒包括10×緩沖液，ATP，dNTPs，Bst?polymerase，RecA蛋白，UvrD?helicase，海藻糖，HDA引物對，陽性對照DNA和ddH₂O。

7.根據權利要求6所述的所述一種谷物粉狀食品中稻米成分的HDA檢測試劑盒，其特征在于：所述HDA引物對序列為：

SEQ?ID?No：1：5’-AGCACCTTCTTGTTACCGCG-3’；

SEQ?ID?No：2：5’-GAACCGCATGTTGTAAACGA-3’；

所述引物對由上海生工生物工程有限公司合成。