[發明專利]一種基于海參蛋白的降糖降脂肽制備方法及其應用

有效

• 申請號: 201510369021.5
• 申請日: 2015-06-29
• 公開（公告）號: CN104946713B
• 公開（公告）日: 2018-10-26
• 發明（設計）人: 劉學玲;姜乃義;毛學英;宋佳佳
• 申請（專利權）人: 煙臺源力德海洋生物有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K17/10;C07K17/02;A23L33/18
• 代理公司: 北京聯瑞聯豐知識產權代理事務所(普通合伙) 11411
• 代理人: 張清彥

本發明公開一種基于海參蛋白的降糖降脂肽制備方法及其應用，制備方法包括以下步驟：取海參粉，加入去離子水，在水浴中加熱；勻漿，得到海參勻漿液；調節pH值至7.0～10.0，加入蛋白酶I，進行酶解反應2～4h后，向所述反應體系中加入蛋白酶II，繼續酶解2～4h，終止反應，得到海參蛋白水解液；滅活其中的蛋白酶I和蛋白酶II；冷卻后離心除雜質，保留上清液；加入95％乙醇，靜置后離心取上清液，調節上清液pH值至6.0～8.0，并將所述上清液通過截流分子量為3000～10000Da的超濾膜，收集超濾液，即得。采用本發明方法制備的海參蛋白肽對糖尿病和高脂血癥患者可起到良好的降糖降脂作用，食用安全性高。

技術領域

本發明涉及水產品深加工及生物技術領域，特別涉及一種基于海參蛋白的降糖降脂肽制備方法及其應用。

背景技術

隨著社會進步和經濟發展，人們的生活方式發生了很大的改變，糖尿病和高脂血癥等代謝性疾病的發病率逐年升高。據國際糖尿病聯盟(International DiabetesFederation，IDF)統計，截止2013年，全球糖尿病人數已達到3.82億。預計到2035年，全球將有5.92億人受到糖尿病的困擾。目前，我國已成為糖尿病患者人數最多的國家，患者人數已接近1億。長期高血糖會誘發機體脂肪代謝紊亂，導致血脂異常，增加心血管疾病的患病風險。據世界衛生組織(World Health Organization，WHO)公布數據顯示，2008年全球大約有1730萬人死于心血管疾病。截止2012年，我國心血管疾病患者人數為2.9億，每年約有350萬人死于心血管疾病。目前，治療糖尿病的方法包括注射胰島素和口服降糖藥物，但是這些治療方法易引起低血糖、肝臟損傷、乳酸中毒以及胃腸道不適等不良反應。對于高脂血癥的治療，常用的他汀類降脂藥物，長期服用也會對人體產生毒副作用。因此，積極研究食物中的降糖降脂功能成分，開發來源于食物中的安全、天然、高效的降糖降脂肽產品已成為今后糖尿病和高脂血癥等代謝性疾病非藥物治療的重要部分。例如中國專利201210462662.1，吳成業等利用中性蛋白酶水解紫菜，制備具有降糖降脂和降血壓活性的海藻多肽。

海參是海洋中重要的食物和藥物資源。海參體壁是海參主要食(藥)用部位，含有豐富的膠原蛋白、黏多糖以及皂苷，其中海參蛋白含量占其體壁干重80％以上。海參蛋白富含多種生物活性序列，在適當的蛋白酶作用下可釋放出來，成為具有抗氧化、免疫調節、降血壓以及降糖降脂等生物學活性的肽段。近年來，海參蛋白水解產物的活性得到了廣泛的研究。李偉等在中國專利201310215842.4中公開了具有免疫調節、改善睡眠和抗輻射功能的海參果汁飲料；劉凱等在中國專利201410114474.9中利用中性蛋白酶水解海參蛋白制備具有促進術后傷口愈合功效的海參蛋白肽。

目前，關于酶水解海參蛋白的專利技術大多采用單酶或復合酶一步水解的酶解模式，這種酶解模式不利于海參蛋白的水解，也不宜于海參蛋白中生物活性序列的釋放。盡管王納在中國專利201310278840.X中利用堿性蛋白酶和固定化酶(包括中性蛋白酶和木瓜蛋白酶)分步水解海參蛋白，但為了提高固定化酶的酶解效率，需過濾除去堿性蛋白酶初步水解液中的不溶物，此過程會損失部分未水解的海參蛋白。此外，由于酶解過程中堿液的使用以及海洋生物與生俱來的腥味，會使制得的海參蛋白肽具有不良氣味。汪秋寬等在中國專利201210053085.0中利用陰離子樹脂對海參蛋白肽進行脫腥，此法操作繁瑣且耗時、效率低，不利于工業化生產；吳慶林在中國專利201110449621.4中利用活性炭對海參蛋白肽進行去味處理，這種處理方法會損失蛋白多肽中的功能成分而降低其生物學活性。而采用微囊化技術既可以掩蓋海參蛋白肽的不良氣味，又不會損失多肽中的功能成分。

采用雙酶分步水解模式提高海參蛋白的水解度，制備具有降糖降脂活性的海參蛋白肽以及利用微囊化技術提升其品質的研究尚未發現。因此，開發一種可控制的酶法制備高活性、風味優良的海參蛋白降糖降脂肽的方法具有重要的理論意義和應用價值。

發明內容