[發明專利]一種海洋來源小單孢菌SCSIO01819、酶制劑溶液及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201510366099.1
• 申請日: 2015-06-26
• 公開（公告）號: CN104894034B
• 公開（公告）日: 2018-01-19
• 發明（設計）人: 龍麗娟;尹浩;田新朋;齊振雄;尹團;張偲
• 申請（專利權）人: 中國科學院南海海洋研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N9/20;C12N9/52;C12P21/06;C12R1/30
• 代理公司: 廣州科粵專利商標代理有限公司44001
• 代理人: 朱聰聰,劉明星

1.海洋來源的小單胞菌(Micromonospora chalcea)SCSIO 01819，保藏編號：CGMCC No.M 9737。

2.權利要求1所述的海洋來源的小單胞菌(Micromonospora chalcea)SCSIO 01819在制備用于珍珠脫脂的酶制劑溶液-1及制備用于魷魚內臟蛋白水解的酶制劑溶液-2中的應用。

3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述的用于珍珠脫脂的酶制劑溶液-1，是通過以下方法制備的：

將海洋來源的小單胞菌(Micromonospora chalcea)SCSIO 01819菌種轉接到菌種活化培養基中，在28～37℃下培養12～48小時，將活化的菌液加入誘導產酶發酵培養基的容器中，在pH＝7.5～8.0、溫度28～37℃下培養12～96小時，當發酵液脂肪酶活力達到1000～3000U /mL，蛋白酶活力達到1500～3000U /mL時，停止發酵，將菌液離心除去菌體和殘余培養基，上清液經超濾進一步除去殘留菌體，即得到用于珍珠脫脂用的SCSIO 01819酶制劑溶液-1；

所述的用于魷魚內臟蛋白水解的酶制劑溶液-2，是通過以下方法制備的：

將海洋來源的小單胞菌(Micromonospora chalcea)SCSIO 01819菌種轉接到菌種活化培養基中，在28～37℃下培養12～48小時；將活化的菌液加入誘導產酶發酵培養基的容器中，在pH＝7.5～8.0、溫度28～37℃下培養12～96小時，蛋白酶活力達到2500～3000U /mL時，停止發酵，將菌液離心除去菌體和殘余培養基，上清液經超濾進一步除去殘留菌體，即得到用于魷魚內臟蛋白水解用的SCSIO 01819酶制劑溶液-2。

4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，所述的活化培養基，每1L培養基的配方為：酵母提取物4.0g，麥芽提取物10.0g，葡萄糖4.0g，50％陳海水1.0L。

5.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，在用于珍珠脫脂的酶制劑溶液-1的制備中，所述的誘導產酶發酵培養基，每1L培養基的配方為：玉米粉2.0～4.0g，大豆粉0.5～2.0g，馬氏珍珠貝軟體部的石油醚浸提物1.0～1.5g，蔗糖0.5～2.0g，30～50％陳海水1L，超濾膜的截流分子量為100～300KDa，所述的馬氏珍珠貝軟體部石油醚浸提物是干燥軟體部經石油醚浸泡提取后，取提取液減壓蒸干所得的殘留物。

6.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，在用于魷魚內臟蛋白水解的酶制劑溶液-2的制備中，所述的誘導產酶發酵培養基，每1L培養基的配方為：玉米粉2.0～4.0g，大豆粉0.5～2.0g，脫脂魷魚內臟漿2.0～4.0g，蔗糖0.5～2.0g，30～50％陳海水1L，超濾膜的截流分子量為100～300KDa，所述的脫脂魷魚內臟漿是將魷魚內臟勻漿后，加入等體積水攪拌均勻，以石油醚或正己烷萃取三次后，下層液體蒸發掉除去一半水分制得。

7.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，所述的用于珍珠脫脂的酶制劑溶液-1在珍珠層脂類脫除中的應用。

8.根據權利要求7所述的應用，其特征在于，包括以下步驟：

(1)、將珍珠原珠與SCSIO 01819酶制劑溶液-1以珠-液比1：2～5比例(m：v)混合，調節pH值到8.5～13.0，溫度28～37℃，浸泡脫脂12～24小時，將珍珠從SCSIO 01819酶制劑溶液-1中取出，并用濾紙吸干表面液體；

(2)、將步驟(1)處理所得珍珠用無水乙醇浸泡，珍珠與無水乙醇的比例為1：2～3(m/v)，0.5～2小時后取出珍珠用濾紙吸干表面溶劑，重復3次后晾干，脫去珍珠層水分和殘留酶制劑，即可脫除珍珠層脂類。

9.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，所述的用于魷魚內臟蛋白水解的酶制劑溶液-2在制備魷魚內臟水解蛋白中的應用。

10.根據權利要求9所述的應用，其特征在于，包括以下步驟：

將魷魚內臟碎成漿狀后與SCSIO 01819酶制劑溶液-2按體積比1～5:1(v：v)混合進行酶解，反應的起始pH值為7.0～13.0，溫度為40～50℃，時間10～20小時，酶解物經靜置，分為粗脂肪層和水層，除去脂肪層后干燥，即得具有促進水產動物生長和降低死亡率功能的魷魚內臟水解蛋白。