[發明專利]IFITM3蛋白裝載的外泌體在制備抗登革病毒干擾素拮抗株感染藥物中的應用

在審

• 申請號: 201510365001.0
• 申請日: 2015-06-29
• 公開（公告）號: CN105012935A
• 公開（公告）日: 2015-11-04
• 發明（設計）人: 黎孟楓;朱勛;何振健;吳玨珩;袁潔;文維韜;胡憶文;陳嘉慧;于暕辰;安樹;董信懷;潘靜;周睿;王小群
• 申請（專利權）人: 中山大學
• 主分類號: A61K38/17
• 分類號: A61K38/17;A61K35/36;A61K48/00;A61P31/14;C12N15/66;C12N15/85
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 任重

1.?IFITM3蛋白裝載的外泌體在制備抗登革病毒干擾素拮抗株感染藥物中的應用，其特征在于，所述外泌體可以特異性的作用于登革病毒干擾素拮抗株，抑制病毒穿過細胞膜進入細胞內；

所述外泌體的制備方法為構建IFITM3穩定高表達的HEK-293T細胞株，收集高表達IFITM3的293T細胞培養基上清，并采用蔗糖密度梯度超速離心法離心所得上清，即得所述外泌體。

2.?根據權利要求1所述的IFITM3蛋白裝載的外泌體在制備抗登革病毒干擾素拮抗株感染藥物中的應用，其特征在于，所述外泌體的產量鑒定方法為應用Western?Blotting檢測蔗糖密度梯度超速離心法得到外泌體中IFITM3的蛋白水平。

3.?根據權利要求1所述的IFITM3蛋白裝載的外泌體在制備抗登革病毒干擾素拮抗株感染藥物中的應用，其特征在于，所述外泌體將IFITM3傳遞給受體細胞，鑒定方法為采用所述外泌體處理HeLa受體細胞后，應用Western?Blotting檢測HeLa細胞中IFITM3的蛋白水平。

4.?根據權利要求1所述的IFITM3蛋白裝載的外泌體在制備抗登革病毒干擾素拮抗株感染藥物中的應用，其特征在于，所述外泌體的活性鑒定方法為應用實時熒光定量法檢測細胞內感染的登革病毒RNA和培養基上清中病毒RNA。

5.?根據權利要求1所述的IFITM3蛋白裝載的外泌體在制備抗登革病毒干擾素拮抗株感染藥物中的應用，其特征在于，所述外泌體將抗病毒蛋白IFITM3傳遞給受體細胞后，受體細胞是否能獲得抗病毒能力，鑒定方法為應用免疫熒光的方法檢測經過所述外泌體處理的HeLa受體細胞的病毒感染情況。

6.?根據權利要求1所述的IFITM3蛋白裝載的外泌體在制備抗登革病毒干擾素拮抗株感染藥物中的應用，其特征在于，所述外泌體是否會刺激受體細胞產生干擾素，鑒定方法為應用ELISA檢測受體細胞HeLa的培養上清中的IFN-α和IFN-β的蛋白水平。