[發明專利]一種皮膚長壽因子肽及其制備工藝

在審

• 申請號: 201510363029.0
• 申請日: 2015-06-26
• 公開（公告）號: CN104894197A
• 公開（公告）日: 2015-09-09
• 發明（設計）人: 陳棟梁
• 申請（專利權）人: 夢工坊技術（武漢）有限公司
• 主分類號: C12P21/02
• 分類號: C12P21/02;C12R1/865
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種皮膚長壽因子肽的制備工藝，其特征在于：所述制備工藝的具體步驟如下：

(1)生產用種子菌的準備：

活化釀酒酵母(Saccharomyces?cerevisiae)種子液18～30小時，菌體增殖濃度達到85gDCW/L～175gDCW/L；

(2)生產用富氮培養基的制備：

將魚皮堿泡、酸泡并用流水沖洗至中性后，加10倍蒸餾水勻漿，用45℃熱水恒溫提取12h，獲得含魚膠原蛋白的水提液；在45℃下，調pH至7.0，中性蛋白酶添加量2000U/g，不斷攪拌酶解4h，獲得含魚膠原蛋白肽的酶解液；將酶解液與蒸餾水按體積比1:0.5～1:2混勻，加入清蛋白多肽1.0～4.0％(w/w)，葡萄糖1.0～3.0％(w/w)；將配制好的發酵培養基0.1MPa、121℃滅菌、滅酶20min；

(3)超氧誘導發酵：

培養基滅菌后降溫至15～40℃，按接種量5％～15％(v/v)接入步驟(1)活化好的種子液，培養0～30小時后向發酵液中添加3mmol/L～300mmol/L?H₂O₂或0.1mmol/L～10mmol/L水楊酸(SA)，15～40℃間歇攪拌培養1～3天后停止發酵；

(4)后處理：

發酵液300～700W微波破壁20～60min后經板框過濾器初濾，再經中空纖維超濾膜精濾，將濾液濃縮、噴霧干燥后制得成品。

2.如權利要求1所述的皮膚長壽因子肽的制備工藝，其特征在于：步驟(1)中，所述的釀酒酵母購置于中國典型培養物保藏中心，菌株保藏編號為CCTCC?AY?92025，活化種子液24小時，菌體濃度達到160gDCW/L。

3.如權利要求1所述的皮膚長壽因子肽的制備工藝，其特征在于：步驟(2)中，將魚皮酶解液作為發酵培養基，培養基滅菌與滅酶同時進行，培養基組成如下：酶解液與蒸餾水按體積比1:1混勻，加入清蛋白多肽2.0％(w/w)，葡萄糖2.0％(w/w)，其碳氮比為10:3。

4.如權利要求1所述的皮膚長壽因子肽的制備工藝，其特征在于：步驟(3)中，培養基滅菌后降溫至30℃，按接種量12％(v/v)接入步驟(1)活化好的種子液，間歇攪拌培養12小時后向發酵液中添加30mmol/L?H₂O₂或間歇攪拌培養15小時后向發酵液中添加1mmol/L水楊酸(SA)，30℃間歇攪拌培養2天后停止發酵。培養基因釀酒酵母的培養發酵達到去腥脫苦的目的。

5.如權利要求1所述的皮膚長壽因子肽的制備工藝，其特征在于：步驟(4)中，發酵液600W微波破壁40min后經板框過濾器初濾，再經中空纖維超濾膜精濾。

6.如權利要求1所述的皮膚長壽因子肽的制備工藝，其特征在于：步驟(4)中，制備獲得的皮膚長壽因子肽，其多肽含量≥93.0％、羥脯氨酸≥7.6％、谷胱甘肽(GSH)含量≥2.2％、多糖含量≥0.6％。

7.如權利要求1所述的皮膚長壽因子肽的制備工藝，其特征在于：步驟(4)中，制備獲得的皮膚長壽因子肽，其中分子量范圍為：200～900Da。