[發明專利]基于LAMP技術檢測罌粟殼成分的引物、試劑盒及方法

有效

• 申請號: 201510362886.9
• 申請日: 2015-06-25
• 公開（公告）號: CN105087556B
• 公開（公告）日: 2018-02-16
• 發明（設計）人: 陳定虎;陳祖華;劉恭源;熊仁廣;王振華;周敏;劉曉媚;吳穎兒;張靜;馮雪雅
• 申請（專利權）人: 陳定虎
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12Q1/6895;C12Q1/6844
• 代理公司: 中山市興華粵專利代理有限公司44345
• 代理人: 吳劍鋒

技術領域

本發明涉及一種基于LAMP技術檢測罌粟殼成分用的引物,本發明還涉及一種包含上述引物的試劑盒，本發明還涉及一種采用上述引物檢測罌粟殼成分的方法，屬于生物技術領域。

背景技術

罌粟學名：Papaver somniferum L.,罌粟科植物，是制取鴉片的主要原料，未成熟果實含乳白色漿液，制干后即為鴉片，其提取物也是多種鎮靜劑的來源，如嗎啡、可待因、和罌粟堿等多種生物堿，其中嗎啡是其主要成分，加工入藥，有斂肺、澀腸、止咳、止痛和催眠等功效，治久咳、久瀉、久痢、脫肛、心腹筋骨諸痛；學名“somniferum”的意思是“催眠”，反映出其具有麻醉性。罌粟的種子罌粟籽是重要的食物產品，其中含有對健康有益的油脂，廣泛應用于世界各地的沙拉中，而罌粟花絢爛華美，是一種很有價值的觀賞植物。罌粟果殼性微寒，味酸澀，有小毒，含低量嗎啡等生物堿。另含多糖約2.4％，水解可得乳糖10％、阿拉伯糖6％、木糖6％、鼠李糖4％、乳糖醛酸Galacturonic acid60％、4-0-甲基葡萄糖醛酸4-0-Methylglucuronic acid4％、微量巖藻糖Fucose、2-0-甲基巖藻糖2-0-Methylfucose、2-0-甲基木糖2-0-Methylxylose及葡萄糖醛酸G-tucuronic acid、景天庚糖Sedoheptulose、D-甘露庚酮糖D-Mannoheptulose、D-甘油基-D-甘露辛酮糖D-Glycero-D-Mannooctulose、內消旋肌醇Mesoinositol、赤蘚醇Erythritol，有斂肺、澀腸、止痛的作用，用于久咳、久瀉、脫肛、脘腹疼痛，但是該品易成癮，不宜常服。目前一些不法商販將罌粟殼作為食品添加劑加入到火鍋底料、鹵湯、燒烤味調料等食品中，使人食用后產生快感，并逐漸產生依賴性以達到招攬回頭客的目的。人如果長期食用含有罌粟成分的食物，就會出現興奮、煩躁不安、冒虛汗、全身乏力犯困、面黃肌瘦等慢性中毒癥狀，還會使人嗜睡、性格改變、記憶力減退，長期食用還會導致精神失常、出現幻覺；還容易是車輛駕駛員犯困、注意力不集中而造成交通事故；添加了罌粟殼的食品由于非常容易使人上癮，甚至走上吸毒犯罪的道路等等，這種違法行為嚴重損壞了消費者的健康，業已成為食品安全的嚴重的隱患。我國早就明文禁止在食品中添加罌粟成分的，國務院已經將罌粟殼列入《麻醉藥品管理辦法》名錄中，將罌粟殼按照麻醉品進行管理。因此，建立一種更加快速、靈敏、方便的檢測方法是保障人民身體健康的一項重要手段、是行政執法的技術后盾、新的檢測技術和方法已經成為一項迫切需要的政治任務，刻不容緩。

目前我國對于罌粟的檢測還沒有一個統一的標準，主要檢測方法有化學分析法、薄層色譜法、免疫分析法、氣質聯用法以及液相色譜法等。化學分析法是根據罌粟殼所含的生物堿與特定試.反應.色來作定性檢.，簡.迅速但靈敏度低；薄層色譜法也是根據罌粟殼所含的生物堿來檢測，可以同時檢測多種生物堿，但是檢測靈敏度也低、特異性差，且易污染環境；免疫分析法是利用罌粟的生物堿制備的特異性抗體來檢測生物堿抗原的存在與否，檢測靈敏度可達0.1-20ug/kg,該方法比較快速、通量較高、靈敏度也較強，可以作為日常大量樣品篩查檢測之用，但是該方法不能準確定量，且抗體制備較難又不易保存，重復性不高，假陽性率高。氣相色譜法GC、氣相色譜質譜法GC-MS、高效液相色譜法HPLC、液相色譜-串聯質譜法LC-MS：可以檢測嗎啡和可卡因等，雖然檢測靈敏度較高，但都需要昂貴的設備、環境要求高、檢測周期長、檢測費用昂貴、還需要專業訓練過的技術人員，不適合基層和現場檢測。另外上述方法都是對生物堿進行間接的檢測，不能對罌粟物種來源進行準確的定性。

目前火鍋底料和小吃類食品等中的非法添加罌粟殼的現象已經引起了人們對食品安全問題的高度重視和全社會的廣泛關注，為了能夠盡快準確的給監管執法提供執法依據，迫切需要能夠又快又準又方便且適合基層普通實驗室對罌粟物種來源進行準確的定性的檢測方法。

目前已有的檢測方法，其檢測步驟繁瑣，采用儀器昂貴，不能快速、方便的實現檢測罌粟殼成分。故此，現有檢測罌粟殼成分的檢測方法有待進一步完善。

發明內容

本發明的目的是為了克服現有技術中的不足之處，提供一種基于LAMP技術檢測罌粟殼成分用的引物；

本發明另一個目的提供一種包含上述引物的試劑盒；

本發明另一個目的是提供一種采用上述試劑盒檢測罌粟殼成分的方法，該方法具有快速、檢測靈敏度高、操作簡單、結果直接可以判讀等特點。

為了達到上述目的，本發明采用以下方案：