[發明專利]制備乳鐵蛋白的方法

在審

• 申請號: 201510362421.3
• 申請日: 2015-06-26
• 公開（公告）號: CN104926936A
• 公開（公告）日: 2015-09-23
• 發明（設計）人: 陳偉;侯慧敏;劉宇;王軼欽;陳云;史玉東;母智深
• 申請（專利權）人: 內蒙古蒙牛乳業（集團）股份有限公司
• 主分類號: C07K14/79
• 分類號: C07K14/79;C07K1/18
• 代理公司: 北京清亦華知識產權代理事務所(普通合伙) 11201
• 代理人: 李志東

技術領域

本發明涉及食品技術領域，具體地，本發明涉及制備乳鐵蛋白的方法。

背景技術

乳鐵蛋白(lactoferrin，LF)是乳汁中一種重要的非血紅素鐵結合糖蛋白，中性粒細胞顆粒中具有殺菌活性的單體糖蛋白。其分子量為80kDa，主要由乳腺上皮細胞表達和分泌。乳鐵蛋白不僅參與鐵的轉運，而且具有廣譜抗菌、抗氧化、抗癌、調節免疫系統等強大生物功能，被認為是一種新型抗菌、抗癌藥物和極具開發潛力的食品和飼料添加劑。然而，目前國內并沒有生產乳鐵蛋白的廠家；現有文獻記載，乳鐵蛋白均通過酪生產的乳清或由牛初乳提取獲得，且活性較低。

因而，目前制備乳鐵蛋白的方法仍有待改進。

發明內容

本發明旨在至少解決現有技術中存在的技術問題之一。為此，本發明的一個目的在于提出一種能夠有效制備獲得高活性乳鐵蛋白的方法。

需要說明的是，本發明是基于發明人的下列發現而完成的：

發明人發現，以液體乳為原料，通過離子吸附交換提取乳鐵蛋白，能夠保留完整的乳鐵蛋白及其天然構型，另外，選用強陽離子交換樹脂可以使乳鐵蛋白快速高效的吸附到吸附柱上。此外，天然的乳鐵蛋白極易受熱變性，從而失去活性，因而為了獲得高活性的乳鐵蛋白，在進行離子交換吸附時，需要注意原料溫度的影響。

進而，根據本發明的一個方面，本發明提供了一種制備乳鐵蛋白的方法。根據本發明的實施例，該方法包括以下步驟：利用陽離子交換樹脂對溫度不超過60攝氏度的液體乳進行離子交換處理，并通過洗脫獲得含有乳鐵蛋白的鹽溶液；以及對所述含有乳鐵蛋白的鹽溶液進行脫鹽處理，以便獲得所述乳鐵蛋白，其中，所述陽離子交換樹脂的功能基團為磺丙基或SO₃。

發明人驚奇地發現，利用本發明的方法能夠從液體乳中有效提取獲得乳鐵蛋白，并且，本發明的方法操作簡單、成本低、效率高、適于工業化生產，且獲得的乳鐵蛋白活性高，質量好。

另外，根據本發明上述實施例的制備乳鐵蛋白的方法還可以具有如下附加的技術特征：

根據本發明的實施例，所述液體乳的溫度為48～55攝氏度。由此，能夠有效防止乳鐵蛋白受熱變性。

根據本發明的實施例，在進行所述離子交換處理之前，所述液體乳被預先進行脫脂處理。由此，有利于乳鐵蛋白的提取、純化。

根據本發明的實施例，所述液體乳的粒徑分布D90為1微米以下。由此，易于離子交換吸附的進行，乳鐵蛋白提取效率高。

根據本發明的實施例，所述陽離子交換樹脂的粒徑為180-220微米，優選200微米。由此，離子交換吸附效率高，效果好，有利于乳鐵蛋白的提取。

根據本發明的實施例，在進行所述離子交換處理時，所述液體乳在離子交換柱中保留時間為4-10分鐘。根據本發明的一些優選實施例，所述液體乳在離子交換柱中保留時間為6-8分鐘。由此，能夠有效提高離子交換吸附的效率，有利于乳鐵蛋白的提取。

根據本發明的實施例，所述洗脫為梯度洗脫，所述梯度洗脫包括：利用水進行預洗脫；利用第一洗脫溶液進行第一洗脫；以及利用第二洗脫溶液進行第二洗脫，其中，所述第一洗脫溶液和第二洗脫溶液分別獨立地含有選自氯化鈉、氯化鉀、氯化鎂及氯化鈣的鹽的至少一種，并且所述第二洗脫溶液中的鹽濃度高于所述第一洗脫溶液中的鹽。由此，能夠有效洗脫獲得乳鐵蛋白，且獲得的乳鐵蛋白能夠保持天然構型，結構完整，純度高，活性好。

根據本發明的實施例，所述第一洗脫溶液為25質量％-35質量％的氯化鈉溶液，優選30質量％的氯化鈉溶液；所述第二洗脫溶液為75質量％-100質量％的氯化鈉溶液，優選80質量％-90質量％的氯化鈉溶液。由此，提取獲得的乳鐵蛋白純度高，活性好。

根據本發明的實施例，利用孔徑為30000-80000Da的有機膜進行所述脫鹽處理。由此，能夠有效提高乳鐵蛋白的純度。

根據本發明的一些具體示例，膜濃縮倍數為9-11，且電離度低于0.1ms/ds。由此，能夠有效防止損傷乳鐵蛋白的活性。

根據本發明的實施例，進一步包括：將所述乳鐵蛋白進行冷凍干燥，以便獲得乳鐵蛋白凍干粉。由此，便于包裝處理，利于工業化生產的進行。

根據本發明的實施例，進一步包括：將所述乳鐵蛋白進行膜除菌處理。由此，能夠有效提高食品安全性，有利于工業化生產的進行。

根據本發明的一些具體示例，利用孔徑為0.2微米的膜進行所述膜除菌處理。由此，除菌效果好，制備獲得的乳鐵蛋白安全性高。

本發明的附加方面和優點將在下面的描述中部分給出，部分將從下面的描述中變得明顯，或通過本發明的實踐了解到。