[發明專利]一種水溶酶解法制備凍干活性胎盤粉的方法

有效

• 申請號: 201510361662.6
• 申請日: 2015-06-26
• 公開（公告）號: CN104894201B
• 公開（公告）日: 2018-10-19
• 發明（設計）人: 劉勇
• 申請（專利權）人: 濟南唐恩生物技術有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;A61K38/02;A61K9/19
• 代理公司: 濟南泉城專利商標事務所 37218
• 代理人: 張世靜

1.一種水溶酶解法制備凍干活性胎盤粉的方法，其特征在于包括如下步驟：

1)取自然分娩、微生物學檢測合格的人胎盤，將胎盤裝入塑料樣本采集袋中，封口并立即放入-20℃冷凍保存；

2)將胎盤從-20℃冷凍箱中取出進行初步解凍，并用水將表面清洗，切成約3cm³的小塊后，用絞肉機攪拌為糜狀物，稱為胎盤漿；

3)將胎盤漿與NaCl溶液按照質量：體積為1:8-1:12的比例，與0.05-0.8％的NaCl溶液混勻，在4-10℃的溫度下，200-300轉/分鐘攪拌提取0.5-3小時，對浸出液以3000-10000轉/min的速度進行管式離心機分離20-60min，對上清液進行-20℃冷凍保存備用，對不溶性沉淀進行酶解操作；

4)將胎盤不溶性沉淀加入恒溫容器中，根據100～250U/g胎盤沉淀的濃度比例加入胃凝乳蛋白酶，充分混勻后在25-39℃水浴環境中酶解2-5h，再根據15～100U/g胎盤的濃度比例加入胰蛋白酶，在25-39℃水浴環境中酶解0.2-1h，最后在95℃水浴中加熱10min使胰蛋白酶失活，得到胎盤酶解液；

5)所得的胎盤酶解液與步驟3)所得的水溶性上清合并后放入樣品盤中，厚度0.5-1.5cm，在-40℃凍結，置于真空冷凍干燥機隔板上，隔板設置溫度為-25℃至-45℃，抽真空度為抽真空度達到0.12-0.18，冷阱溫度-50℃，持續冷凍干燥9h，然后加熱隔板溫度至15-30℃，再持續冷凍干燥0.5-3h，真空度0.005-0.01，使終產品水分含量小于3.5％，即進行下一步粉碎處理；

6)將凍干后的產品放入帶冷卻夾套的粉碎機，在通入4-10℃冷卻水的情況下，在4000-5000轉/分的條件下，粉碎10-15分鐘，通過高速粉化制成胎盤酶解凍干粉，粉碎完成后，使用50-100目的分樣篩進行篩分，未過篩的顆粒再次進行粉碎；

7)將胎盤凍干粉置于臭氧滅菌機中，在0.5-5PPM的臭氧濃度中，滅菌20-50min。