[發明專利]利用DAPI嵌入和釋放模擬DNA納米折紙結構作為藥物載體的方法

有效

• 申請號: 201510360782.4
• 申請日: 2015-06-26
• 公開（公告）號: CN105004703B
• 公開（公告）日: 2018-01-16
• 發明（設計）人: 何丹農;顏娟;胡沖婭;金彩虹
• 申請（專利權）人: 上海納米技術及應用國家工程研究中心有限公司
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;A61K47/26
• 代理公司: 上海東方易知識產權事務所31121
• 代理人: 唐莉莎

1.一種利用DAPI嵌入和釋放模擬DNA納米折紙結構作為藥物載體的方法，其特征在于，通過DNA滾環擴增技術得到長單鏈DNA作為支架鏈，加入訂書釘鏈后進行折紙得到二維DNA納米折紙結構，具備DNA雙鏈強力結合能力的熒光染料嵌入其中，通過嵌入后熒光強度的增高以及DNA納米折紙復合結構降解后染料釋放導致熒光強度下降過程監控DNA納米折紙結構的穩定性并模擬其作為抗腫瘤藥物載體的藥物負載及緩釋過程；

所述的DNA滾環擴增技術，環模板為一堿基數為96的閉合單鏈DNA，且序列為：5’-TATGCCCAGCCCTGTAAGATGAAGATAGCGCACAATGGTCGGATTCTCAACTCGTATTCTCAACTCGTATTCTCAACTCGTCTCTGCCCT GACTTC-3’；

所述的訂書釘鏈共三條，每條都能與長單鏈DNA進行互補雜交，且序列分別為，訂書釘鏈1：5’-CAGCCCTGTAAGATGAAGATAGCGTCTATGCC-3’；訂書釘鏈2： CCCTGACTCACAATGGTCGGATTCCGTCTCTG；訂書釘鏈3： TCTCAACTTCAACTCGTATTCTCAACTCGTAT；

所述的支架鏈加入訂書釘鏈后得到二維DNA納米折紙結構，制備條件是：高溫95℃，三分鐘，后每降0.2℃，持續20s，直至4℃；

所述的二維DNA納米折紙結構，長度可達微米級，寬度為16nm；

所述的具備DNA雙鏈強結合能力的熒光染料，嵌入雙鏈之前熒光微弱，而嵌入后則熒光值大大增強，且能穿透細胞膜的4’，6-二脒基-2-苯基吲哚（4’,6-diamidino-2-phenylindole，DAPI）；

所述的DNA納米折紙復合結構與DAPI形成的復合結構或通過電紡技術所得的DNA納米折紙結構膜與DAPI形成的復合結構。