[發(fā)明專利]利用DAPI嵌入和釋放模擬DNA納米折紙結(jié)構(gòu)作為藥物載體的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510360782.4
• 申請日: 2015-06-26
• 公開（公告）號: CN105004703B
• 公開（公告）日: 2018-01-16
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 何丹農(nóng);顏娟;胡沖婭;金彩虹
• 申請（專利權(quán)）人: 上海納米技術(shù)及應(yīng)用國家工程研究中心有限公司
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;A61K47/26
• 代理公司: 上海東方易知識產(chǎn)權(quán)事務(wù)所31121
• 代理人: 唐莉莎

1.一種利用DAPI嵌入和釋放模擬DNA納米折紙結(jié)構(gòu)作為藥物載體的方法，其特征在于，通過DNA滾環(huán)擴增技術(shù)得到長單鏈DNA作為支架鏈，加入訂書釘鏈后進行折紙得到二維DNA納米折紙結(jié)構(gòu)，具備DNA雙鏈強力結(jié)合能力的熒光染料嵌入其中，通過嵌入后熒光強度的增高以及DNA納米折紙復(fù)合結(jié)構(gòu)降解后染料釋放導(dǎo)致熒光強度下降過程監(jiān)控DNA納米折紙結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性并模擬其作為抗腫瘤藥物載體的藥物負載及緩釋過程；

所述的DNA滾環(huán)擴增技術(shù)，環(huán)模板為一堿基數(shù)為96的閉合單鏈DNA，且序列為：5’-TATGCCCAGCCCTGTAAGATGAAGATAGCGCACAATGGTCGGATTCTCAACTCGTATTCTCAACTCGTATTCTCAACTCGTCTCTGCCCT GACTTC-3’；

所述的訂書釘鏈共三條，每條都能與長單鏈DNA進行互補雜交，且序列分別為，訂書釘鏈1：5’-CAGCCCTGTAAGATGAAGATAGCGTCTATGCC-3’；訂書釘鏈2： CCCTGACTCACAATGGTCGGATTCCGTCTCTG；訂書釘鏈3： TCTCAACTTCAACTCGTATTCTCAACTCGTAT；

所述的支架鏈加入訂書釘鏈后得到二維DNA納米折紙結(jié)構(gòu)，制備條件是：高溫95℃，三分鐘，后每降0.2℃，持續(xù)20s，直至4℃；

所述的二維DNA納米折紙結(jié)構(gòu)，長度可達微米級，寬度為16nm；

所述的具備DNA雙鏈強結(jié)合能力的熒光染料，嵌入雙鏈之前熒光微弱，而嵌入后則熒光值大大增強，且能穿透細胞膜的4’，6-二脒基-2-苯基吲哚（4’,6-diamidino-2-phenylindole，DAPI）；

所述的DNA納米折紙復(fù)合結(jié)構(gòu)與DAPI形成的復(fù)合結(jié)構(gòu)或通過電紡技術(shù)所得的DNA納米折紙結(jié)構(gòu)膜與DAPI形成的復(fù)合結(jié)構(gòu)。