[發(fā)明專利]一種基于原位形成光活性納米材料模擬酶的堿性磷酸酯酶活性檢測方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510348969.2
• 申請日: 2015-06-23
• 公開（公告）號: CN104897846A
• 公開（公告）日: 2015-09-09
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王光麗;金璐怡;吳秀明;曹根霞
• 申請（專利權(quán)）人: 江南大學(xué)
• 主分類號: G01N31/10
• 分類號: G01N31/10;G01N21/33;G01N21/64
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明涉及納米科技領(lǐng)域和生物分析檢測領(lǐng)域，尤其涉及新型的光活性納米材料模擬酶及其在堿性磷酸酯酶活性檢測中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

堿性磷酸酯酶(ALP)是廣泛存在于各種生物組織中的一種酶。ALP的存在濃度與骨骼疾病、肝炎以及前列腺癌等多種疾病的發(fā)生密切相關(guān)[Colombatto?P.；Randone?A.；Civitico?G.；Gorin?J.M.；Dolci?L.；Medaina?N.；Oliveri?F.；Verme?G.；Marchiaro?G.；Pagni?R.；Karayiannis?P.；Thomas?H.C.；Hess?G.；Bonino?F.；Brunetto?M.R.J.Viral?Hepatitis?1996,3,301-306]。此外，ALP具有催化活性高,穩(wěn)定性好,成本低,廣泛的底物特異性等優(yōu)點，是一種被廣泛使用的免疫分析標(biāo)記物，被用于酶聯(lián)免疫測定中[Lei?J.；Ju?H.Chem.Soc.Rev.2012,41,2122-2134；Akanda?M.R.；Tamilavan?V.；Park?S.；Jo?K.；Hyun?M.H.；Yang?H.Anal.Chem.2013,85,1631-1636；Xian?Y.L.；Wang?Z.；Jiang?X.Y.ACS?Nano?2014,8,12741–12747；Geraud?E.；Prevot?V.；Forano?C.；Mousty?C.Chem.Commun.2008,13,1554–1556]。在酶聯(lián)免疫測定中，抗原與抗體之間可以產(chǎn)生特異性的結(jié)合，通過標(biāo)記在抗體上的ALP的催化反應(yīng)產(chǎn)生測量信號。因為單個酶分子可以催化許多個底物分子產(chǎn)生大量的產(chǎn)物，從而使檢測信號放大[Zhang?B.；Tang?D.；Goryacheva?I.；Niessner?R.；Knopp?D.Chem.-Eur.J.2013,19,2496-2503]。目前，以天然酶為標(biāo)記物的酶聯(lián)免疫吸附分析在環(huán)境檢測、食品安全及臨床診斷等方面已經(jīng)成長為重要的技術(shù)之一[Qu?W.；LiuY.；Liu?D.；Wang?Z.；Jiang?X.Angew.Chem.Int.Ed.2011,50,3442-3445]。因此，ALP活性的檢測在臨床疾病診斷以及免疫分析研究中具有重要意義。

目前，大部分針對ALP的檢測方法雖然較為簡單，但是，由于這類方法單純依靠ALP催化產(chǎn)生的產(chǎn)物的電化學(xué)信號或光信號進行檢測，缺少信號放大策略，方法的靈敏度不是很高[Gao?Z.；Xu?M.；Hou?L.；Chen?G.；Tang?D.Anal.Chem.2013,85,6945–6952；Zhang?L.；Zhao?J.；Duan?M.；Zhang?H.；Jiang?J.；Yu?R.Anal.Chem.2013,85,3797-3801；Wei?H.；Chen?C.；Han?B.；Wang?E.Anal.Chem.2008,80,7051–7055；Qian?Z.；Chai?L.；Tang?C.；Huang?Y.；Chen?J.；Feng?H.Anal.Chem.2015,87,2966-2973]。所以，探索高效的信號放大策略以建立高靈敏的ALP活性的檢測方法仍然是需要解決的問題。