[發明專利]HPSE基因作為綿羊免疫性狀的分子標記及其應用

在審

• 申請號: 201510347574.0
• 申請日: 2015-06-21
• 公開（公告）號: CN105002268A
• 公開（公告）日: 2015-10-28
• 發明（設計）人: 王維民;李發弟;張小雪;李沖;潘香羽;喇永富;馬友記;唐德福;席銳;李寶勝
• 申請（專利權）人: 甘肅農業大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 武漢宇晨專利事務所 42001
• 代理人: 張紅兵

技術領域

本發明屬于綿羊分子標記制備技術領域，具體涉及一種HPSE基因作為綿羊免疫性狀的分子標記及其應用。本發明的分子標記克隆自HPSE基因。

背景技術

在養羊業生產中，疾病嚴重威脅著羊只的健康并造成巨大的經濟損失。盡管通過加強飼養管理和應用藥物疫苗等措施可預防疾病，但未能十分有效控制傳染病的流行，同時大量藥物的使用會使動物機體產生耐藥性，給畜產品的安全造成隱患。

長遠來看，從抗病力的遺傳基礎研究出發，篩選抗性基因，從分子水平開展抗病育種，從遺傳上提高羊只對病原的抗性，增強免疫力是從根本上解決這一問題的重要途徑。抗病育種潛在的巨大經濟效益以及某些疾病可作為研究人類疾病動物模型的誘人前景，正有力地推動著這項工作的發展。隨著分子生物學、分子遺傳學和基因工程技術的發展，抗病育種在綿羊的育種中已經開始發揮重要作用。

在抗病育種中，抗病基因的尋找是關鍵。目前國內外已鑒定出的主要抗病候選基因有以下幾個：

(1)天然抗性巨噬結合蛋白1(Natural?resistance‐associated?macrophage?protein?1，Nramp1)，Nramp是一個基因家族，是目前研究較多的宿主抗性基因之一，至少包括2～3個成員，現已發現有Nramp1和Nramp2。國內外學者對Nramp1基因與抗病力的相關性進行了大量的研究，把Nramp1基因作為功能基因研究其結構與動物抗病性狀的報道也較多，但主要集中在人類、小鼠、豬和家禽上(陳冬金，謝喜平，陳巖鋒，等.畜禽Nramp1基因抗病作用的研究進展.畜牧與飼料科學，2012，33(7)∶79‐81.)。綿羊的Nramp1基因定位在1號染色體2q41‐q42的區域(Pitel?F.E.P.Cribiu，M.Yerle，et?al.Regional?localization?of?the?ovine?NRAMP?gene?to?chromosome?2q41‐q42by?in?situ?hybridization.Cytogenet?Cell?Genet，1995，70(1‐2)：116～118.)，山羊的Nramp1基因定位于2號常染色體上長臂q12.2(Vacca?G.M.M.Pazzola，C.Pisano，et?al.Chromosomal?localisation?and?genetic?variation?of?the?SLC11A1gene?in?goats(Capra?hircus).Vet?J，2011.190(1)：60～65.)。研究發現，綿羊Nramp1基因多態性與傷寒沙門氏菌易感性和抗性有關(姚菊霞，王光華，馬利青.羊主要抗病候選基因的研究進展.青海畜牧獸醫雜志，2014,44(5)：40～43.)。Nrampl蛋白可抵抗分枝桿菌、沙門氏菌等多種胞內寄生病原菌的侵染而發揮重要的免疫功能，對畜禽機體抗病力影響較大(吳宏梅等，NRAMPl基因研究進展及其在抗病育種中的應用.中國畜牧獸醫，2005，32(4)：26～28.)。

(2)主要組織相容性復合物(MHC)是由一群緊密連鎖的基因群組成的一個定位于動物某對染色體的特定區域，與免疫應答和抗病性密切相關的多基因家族，在宿主的免疫反應中對病毒、細菌、寄生蟲的控制和清除有重要作用。目前，已證實主要組織相容性復合物與人類和家畜的多種疾病存在著密切關系。因此，近年來對MHC的研究成為家畜抗病育種研究中的前沿部分(孫東曉，張沅.反芻家畜主組織相容性復合物的研究進展.中國畜牧雜志，2002，38(5)：46～47.)。綿羊的MHC稱為OLA(綿羊白細胞抗原)，位于第20號染色體上，具有高度的多態性和連鎖不平衡性。根據MHC抗原結構和功能的不同，可將MHC分為classⅠ型classⅡ型和classⅢ型。一般認為綿羊MHC?classⅡ的多態性和遺傳性是為了保護機體組織對抗疾病的感染。在這個基因區域有DQ和DR兩個亞區，OLAⅡ類分子的DQ和DR亞區的DRB和DQB兩個基因位點所編碼的MHC在抗原免疫系統中發揮著最主要的作用；其第2個外顯子編碼抗原的功能區(抗原結合區)具有豐富的多態性，它組成Ⅱ類抗原分子功能最重要的部分。此外，MHC與生產性能具有密切的聯系，但需要進一步研究才能應用于家畜的遺傳標記。