[發(fā)明專利]HPSE基因作為綿羊免疫性狀的分子標(biāo)記及其應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510347574.0
• 申請(qǐng)日: 2015-06-21
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN105002268A
• 公開(kāi)（公告）日: 2015-10-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王維民;李發(fā)弟;張小雪;李沖;潘香羽;喇永富;馬友記;唐德福;席銳;李寶勝
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12Q1/68
• 分類號(hào): C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 武漢宇晨專利事務(wù)所 42001
• 代理人: 張紅兵

1.一種克隆的與綿羊免疫性狀相關(guān)的分子標(biāo)記，它的核苷酸序列如下所示：

CACCTGGAGGGCTTTGAGCGCTTGAATTTACTGCCCAGTGTAGGACAAGTAACGCTGTGCCAGGCTCCAGTCTCTTACACGCTGGTAATGTTGTAGCCACACGTTCTAAAACACAAACTCACTCAGAAGGACAATGCAGATAGTGGAGTGCAGTTTATTACACCAGCGGGCCCAAGGCAGAGCCTCCTCTTAGCCAAGACCCTGACCAGTTTTTCTGAAAACCTTGTATACCCTAGTGTTCATGCCAAACCCACCTCCCCAAATTCCCTGAAACTAGTCTGAACAAAGGAAAAGAAAGATACAATCAAAGATAACTTTGGGCTTCATATGCCTTACGCCTAGGAAGTTAACAGCAGACAGTTATCAATAGGCCTGTGGTCATACCCCAATAAGCAAAATAGAATTTATGATTCTATTCGGTTACACTGATAATTAGGGTATTCTTTTAGGCAACAGAGAGTCTAGGTAGGAGCCCTRCGGCTCTTCCATGCAGGGGGCCTGGTTTTCCAGTTGATATGTCGTTTCCATAGATACTGGACATATAAGTCAAAGTCCACAGTCTGGCCCAAGATGGAGCCTGTTCTGTCTGTTTCCTCCTTCATCGCCCCCTCTTGATGCTCTTAACCCATAGTATGAACATCATTCATAGGGATATATTGCACCCTGACTCTCCGACCTCCAATTTGGGAGAACGACATCAACCTTTGGGTTACAAATTTCATAATAGATTGTAAAATAAAGGGTCCACAAAGCAGAACTATCAAGGCAA

上述序列第477bp處的R是A或G，該突變導(dǎo)致PCR-Fnu4HⅠ-RFLP多態(tài)性。

2.一種檢測(cè)權(quán)利要求1所述分子標(biāo)記的PCR引物對(duì)，其特征在于，該引物對(duì)的DNA序列如下所示：

正向引物：CACCTGGAGGGCTTTGAG，

反向引物：TTGCCTTGATAGTTCTGCTT。

3.一種與綿羊免疫性狀相關(guān)的分子標(biāo)記的制備方法，其特征在于，所述的方法包括以下步驟:

從綿羊湖羊全血中提取基因組DNA，在位于綿羊HPSE基因突變位點(diǎn)附近設(shè)計(jì)一對(duì)引物對(duì)，該引物對(duì)的DNA序列如權(quán)利要求2所示，對(duì)綿羊基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增和序列測(cè)定，得到如SEQ?ID?NO：2所示的序列，通過(guò)序列比對(duì)，篩查SNP，再利用權(quán)利要求2所示的引物對(duì)進(jìn)行PCR擴(kuò)增，將PCR擴(kuò)增獲得的片段進(jìn)行Fnu4H?Ⅰ酶切分型及檢測(cè)。

4.權(quán)利要求1所述的分子標(biāo)記在綿羊免疫性狀檢測(cè)中的應(yīng)用。

5.權(quán)利要求2所述的PCR引物對(duì)在綿羊免疫性狀檢測(cè)中的應(yīng)。