[發(fā)明專利]溫度敏感型載體pBBR1MCS?2?Ts3及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510340762.0
• 申請日: 2015-06-18
• 公開（公告）號: CN104894155B
• 公開（公告）日: 2017-11-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 黃建忠;江賢章;周芬;劉洪嬌;祁峰;張明亮;陶勇
• 申請（專利權(quán)）人: 福建師范大學(xué)
• 主分類號: C12N15/66
• 分類號: C12N15/66;C12N15/63
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司11245
• 代理人: 關(guān)暢,任鳳華

1.構(gòu)建重組載體的方法，是將SEQ ID No.1的第1557-2526位所示的DNA片段替換為目的基因表達(dá)盒，并保持SEQ ID No.1的其他核苷酸不變，得到的重組DNA即為所述重組載體；

所述目的基因表達(dá)盒編碼的蛋白質(zhì)為將SEQ ID No.2所示的蛋白質(zhì)進(jìn)行A3）的改造、保持SEQ ID No.2的其它氨基酸殘基均不變得到的蛋白質(zhì)：所述A3）為將SEQ ID No.2第86位的Arg突變?yōu)镃ys；

所述目的基因表達(dá)盒中啟動所述目的基因表達(dá)的啟動子為將SEQ ID No.1的第1557-1793位所示的DNA分子進(jìn)行如下C31）和C32）的改造、保持SEQ ID No.1的第1557-1793位核苷酸所示的DNA分子中的其它核苷酸均不變得到的DNA分子：

C31）將SEQ ID No.1第1747位的C突變?yōu)門；

C32）將SEQ ID No.1第1776位的T突變?yōu)锳。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述目的基因表達(dá)盒中的目的基因?yàn)閷EQ ID No.1的第1794-2456位核苷酸所示的DNA分子進(jìn)行B3）的改造、保持SEQ ID No.1的第1794-2456位核苷酸所示的DNA分子中的其它核苷酸均不變得到的DNA分子；所述B3）為將SEQ ID No.1第2049位的C突變?yōu)門。

3.由權(quán)利要求1或2所述方法構(gòu)建的重組載體。

4.含有權(quán)利要求3所述重組載體的重組微生物或重組細(xì)胞系。

5.一種蛋白質(zhì)，其特征在于：所述蛋白質(zhì)為將SEQ ID No.2所示的蛋白質(zhì)進(jìn)行A3）的改造、保持SEQ ID No.2的其它氨基酸殘基均不變得到的蛋白質(zhì)：所述A3）為將SEQ ID No.2第86位的Arg突變?yōu)镃ys。

6.一種DNA分子，其特征在于：所述DNA分子為將SEQ ID No.1的第1794-2456位核苷酸所示的DNA分子進(jìn)行B3）的改造、保持SEQ ID No.1的第1794-2456位核苷酸所示的DNA分子中的其它核苷酸均不變得到的DNA分子；所述B3）為將SEQ ID No.1第2049位的C突變?yōu)門。

7.權(quán)利要求3所述重組載體在作為溫度敏感載體中的應(yīng)用。