[發明專利]一株腸膜明串珠菌及其在低溫青貯中的應用

有效

• 申請號: 201510340177.0
• 申請日: 2015-06-18
• 公開（公告）號: CN104894031B
• 公開（公告）日: 2017-09-26
• 發明（設計）人: 焦湞;陳駿;張淼;施環宇;候振;楊媚;李書博;談重芳;王雁萍
• 申請（專利權）人: 鄭州大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A23K30/18;C12R1/01
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司11245
• 代理人: 關暢,張立娜

技術領域

本發明屬于微生物領域，涉及一株腸膜明串珠菌及其在低溫青貯中的應用。

背景技術

青貯是在乳酸菌的厭氧發酵作用下將碳水化合物轉化為有機酸，從而使pH降低達到長期貯存的目的。乳酸菌和溫度是青貯飼料發酵品質好壞的決定性因素。

燕麥是高寒地區冬春飼補的主要飼料作物，由于高寒地區溫度低海拔高，不利于乳酸菌的生長，很難發酵出品質優良并可以長期貯存的飼料。

因此，篩選出耐高低溫、耐鹽、耐酸堿的抗逆性較強的菌株，并將其作為發酵劑添加到低溫青貯燕麥飼料中，將會對高寒地區的青貯飼料制作有著巨大的應用價值。

發明內容

本發明的第一個目的是提供一株腸膜明串珠菌。

本發明所提供的腸膜明串珠菌具體為腸膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)QH1-605，該菌株已于2015年4月28日保藏于中國典型培養物保藏中心(簡稱CCTCC，地址為：湖北省武漢市武昌區八一路299號武漢大學校內武漢大學保藏中心)，其保藏編號為CCTCC NO：M 2015254。

所述腸膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)QH1-605從中國青海省青海湖鳥島濕地蘆葦上分離得到的，該菌株單菌落為圓形狀，革蘭氏染色呈陽性，不產過氧化氫，不能發酵葡萄糖產氣，發酵類型為同型發酵。在5℃和10℃均長勢良好，45℃以上不能存活，表明該菌株有良好的耐低溫性，耐高溫性較差；在3.0％的NaCl培養基中長勢良好，有一定的耐鹽性；在pH3.5-9的培養環境中生長均良好，表明耐酸堿性能較好。表明該菌株的生長適應能力很強，可耐極端環境存活繁殖。可耐極端環境存活繁殖。其16S rDNA序列如序列表中序列1所示。

本發明的第二個目的是提供一種菌劑。

本發明所提供的菌劑的活性成分為所述腸膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)QH1-605CCTCC NO：M 2015254。

所述菌劑除了包含作為活性成的所述腸膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)QH1-605CCTCC NO：M 2015254外，還可包含輔料，如MRS固體培養基(溶劑為水，溶質及其濃度如下：蛋白胨10g/L，牛肉膏10g/L，酵母膏5g/L，葡萄糖20g/L，三水合乙酸鈉5g/L，吐溫80 1g/L，磷酸氫二鉀2g/L，檸檬酸銨2g/L，硫酸鎂2g/L，硫酸錳0.25g/L，瓊脂17g/L)。

本發明的第三個目的是提供一種青貯飼料添加劑。

本發明所提供的青貯飼料添加劑的活性成分為所述腸膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)QH1-605CCTCC NO：M 2015254。

本發明的第四個目的是提供一種青貯飼料。

本發明所提供的青貯飼料中含有所述青貯飼料添加劑。

所述腸膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)QH1-605CCTCC NO：M 2015254或所述菌劑在如下任一中的應用也屬于本發明的保護范圍：

(a1)抑制細菌；

(a2)制備細菌抑制劑；

(a3)制備所述青貯飼料添加劑；

(a4)制備所述青貯飼料。

所述(a1)的應用為非疾病診斷或治療的應用。

在所述(a1)和所述(a2)中，所述細菌具體可為藤黃微球菌和/或沙門氏菌。

其中，所述腸膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)QH1-605CCTCC NO：M2015254或所述菌劑對所述細菌的抑制具體體現為30℃條件下的抑制。

所述青貯飼料添加劑在制備所述青貯飼料中的應用也屬于本發明的保護范圍。

本發明的第五個目的是提供一種制備所述青貯飼料的方法。

本發明所提供的制備所述青貯飼料的方法，具體可包括：將青貯原料與所述腸膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)QH1-605CCTCC NO：M 2015254混合，進行厭氧固體發酵，收集所有發酵產物，得到所述青貯飼料；

在本發明中，所述青貯原料為燕麥全株；具體為乳熟期燕麥全株，水分含量82.97％，切割成1-2cm小段。。