[發明專利]柑桔褪綠矮化相關病毒的LAMP檢測引物組、試劑盒及檢測方法有效
| 申請號： | 201510330728.5 | 申請日： | 2015-06-15 |
| 公開（公告）號： | CN104862426B | 公開（公告）日： | 2017-12-08 |
| 發明（設計）人： | 劉科宏;周常勇;李中安;陳洪明;周彥 | 申請（專利權）人： | 西南大學柑桔研究所 |
| 主分類號： | C12Q1/70 | 分類號： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/94 |
| 代理公司： | 重慶市前沿專利事務所(普通合伙)50211 | 代理人： | 郭云 |
| 地址： | 400712 重*** | 國省代碼： | 重慶;85 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 柑桔 矮化 相關 病毒 lamp 檢測 引物 試劑盒 方法 | ||
1.一種柑桔褪綠矮化相關病毒的LAMP檢測方法，其特征在于：以待測樣品總DNA為模板，應用外引物對F3、B3和內引物對FIP、BIP在63～65℃恒溫反應條件下，進行環介導恒溫擴增反應60～80min，擴增完成后78～82℃反應5～10min中止反應，然后根據渾濁度或熒光染料染色或電泳條帶，鑒定植株樣品是否感染柑桔褪綠矮化相關病毒；所述引物序列為:
外引物對：
F3：5’-ACCAGGAGTGGAGGACAAT-3’；
B3：5’-CCTTACACCCCGGAGGAA-3’；
內引物對：
FIP：5’-ACCTGGGCCTCCTTCTTCTCTTGGGACAAGCCGTGTAACG-3’；
BIP：5’-AGAAGCCCAAGATTGCTGGGGACCTTTGCTCGACTTTCTCC-3’。
2.如權利要求1所述的柑桔褪綠矮化相關病毒的LAMP檢測方法，其特征在于：擴增反應中，總體積25μL的反應體系含有18μL反應液A、5μL引物液B、濃度為20～100ng/μL的DNA溶液2μL；其中18μL反應液A含有：2.5μL 10×Bst buffer、6μL 25mM的MgCl2、2μL 4mM的Betaine、3.5μL 10mM的dNTPs、1μL 8U/μL的Bst聚合酶、3μL水；所述5μL引物液B包括2μL 20μM的FIP、2μL 20μM的BIP、0.5μL 10μM的F3、0.5μL 10μM的B3。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于西南大學柑桔研究所，未經西南大學柑桔研究所許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201510330728.5/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
