[發明專利]一種復合型血小板凝膠及其制備方法

在審

• 申請號: 201510315609.2
• 申請日: 2015-06-10
• 公開（公告）號: CN105030826A
• 公開（公告）日: 2015-11-11
• 發明（設計）人: 王海平;郭希民;錢智勇;張雅妮;周勇;邵春燕;卓海龍;王全立
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍軍事醫學科學院附屬醫院
• 主分類號: A61K35/16
• 分類號: A61K35/16;A61K35/19;A61K47/36;A61K9/06;A61P17/02;A61L27/36;A61L27/20;A61L27/52
• 代理公司: 北京尚誠知識產權代理有限公司 11322
• 代理人: 魯兵

技術領域

本發明屬于生物醫藥工程領域，具體涉及一種復合型血小板凝膠及其制備方法。

背景技術

新近的研究發現，血小板除發揮凝血、止血等經典的生理功能外，還儲備著人體合成的大量重要細胞因子和生物活性物質，特別是和組織再生、創傷修復密切相關的活性物質、內源性大麻素樣鎮痛物質、以及廣譜抗菌肽(如天然防御素等)。當機體組織受損時，血小板最早被迅速招募至創傷局部，活化后釋放出血小板儲備的平均高于外周血濃度4-5倍的天然細胞因子(主要包括血小板源性生長因子、血管內皮細胞生長因子、胰島素樣生長因子-1、堿性成纖維細胞生長因子和肝細胞生長因子等)和生物活性物質(主要包括5-羥色胺、天然防御素、內源性類大麻樣鎮痛物質等)。通過招募白細胞，趨化干/祖細胞并促進其分化增殖，以及促進局部血管新生、膠原合成，血小板在組織再生與創傷修復中發揮著極其重要的作用，因而日益受到關注，成為近年來創傷修復與再生醫學領域研究的熱點之一。國內外已有在臨床上應用富血小板血漿(platelet-richplasma，PRP)治療骨缺損、軟組織缺損、難治性糖尿病皮膚潰瘍等的多項研究報告，結果均證明：PRP能明顯促進患者的創傷修復，且安全無毒、患者耐受性好、無不良反應發生(1.KimDH,KimJY,SeoSH,etal.Recalcitrantcutaneousulcerofcomorbidpatienttreatedwithplateletrichplasma:acasereport.JKoreanMedSci2012；27:1604-1606.2.GiovaniniAF,GonzagaCC,ZielakJC,etal.Platelet-richplasma(PRP)impairsthecraniofacialbonerepairassociatedwithitselevatedTGF-βlevelsandmodulatestheco-expressionbetweencollagenIIIandα-smoothmuscleactin.JOrthoRes2011；29(3):457-463.3.李明，張長青，艾自勝等.關節腔內注射富血小板血漿對膝關節軟骨退行性變的治療作用。中國修復重建外科雜志.2011；25(10):1192-1196.)。本申請的發明人在前期也開展了PRP促進血管生成、創面愈合、造血干細胞增殖、肝再生等一系列體內、外研究，結果發現：PRP確實具有促進組織再生、創面愈合、抑制疤痕形成等無可比擬的優勢；但是，也發現PRP在使用中存在如下嚴重缺陷，限制了在臨床上的廣泛應用：

1.PRP在應用時，首先經凝血酶和含鈣離子溶液進行活化，活化后的血小板釋放出細胞因子發揮作用；但體外活化過程中，細胞因子釋放過快、迅速流失且難以控制，因而發揮效應時間過短，生物學效應不能持久；

2.PRP活化過程中，快速形成的纖維蛋白網彈性和穩定性差、易收縮，不利于體內干/祖細胞的趨化和植入；

3.PRP和常規使用的外科敷料結合差，造成大部分有效成分損失；

4.臨床應用時，將活化的PRP浸透外科敷料后直接敷于創面上；由于敷料不具有保濕作用且與周圍組織結合緊密，因此換藥時往往引起難以忍受的劇痛和創面再次損傷。

發明內容

為解決上述問題，本發明目的在于提供一種促進組織再生和創傷修復效果更好、臨床應用更方便的復合型血小板凝膠。

一種復合型血小板凝膠，由殼聚糖與富血小板血漿混合液被活化得到，其微觀結構為：富血小板血漿被活化得到的纖維蛋白網狀結構連結于殼聚糖分子構成凝膠載體支架，血小板來源的細胞因子粘附、錨著于凝膠載體支架中，形成復合型血小板凝膠。

所述的復合型血小板凝膠，活化過程為：先將殼聚糖與富血小板血漿凍融裂解液混合，再加入活化劑靜置，將富血小板血漿中的纖維蛋白原活化成纖維蛋白網狀結構。

所述殼聚糖是北極深海蝦、蟹殼的天然提取物及其衍生物，選用適用于人體的醫用級藥物輔料，殼聚糖在反應體系中的終濃度為0.5-8％(質量/體積濃度，單位g/100ml)，凝膠為噴劑、膏劑或乳劑形式，其中膏劑或乳劑中殼聚糖濃度為6％-8％，噴劑中殼聚糖濃度為0.5％。

所述活化劑為氯化鈣-凝血酶混合液，殼聚糖與富血小板血漿混合液與氯化鈣-凝血酶混合液體積比10:1-4:1。所述氯化鈣-凝血酶混合液中，氯化鈣濃度為20-40mmol/mL，凝血酶濃度為400-1000U/mL，溶劑為無菌水。