[發(fā)明專利]一種誘導(dǎo)西洋參愈傷組織的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510313664.8
• 申請(qǐng)日: 2015-06-08
• 公開（公告）號(hào): CN104885949A
• 公開（公告）日: 2015-09-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 丁之恩;孫雨薇;丁昱;任琪;徐浩;袁艷
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 北京市京大律師事務(wù)所 11321
• 代理人: 王凝;張波

1.一種誘導(dǎo)西洋參愈傷組織的方法，其特征在于，包含原料消毒步驟和愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)步驟，其中消毒是用0.1-0.3％HgCl₂與75％酒精組合進(jìn)行消毒，其中愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)是將消毒后的原料接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的誘導(dǎo)西洋參愈傷組織的方法，其中所述的原料為葉片、莖、主根、須根、種胚。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的誘導(dǎo)西洋參愈傷組織的方法，其中誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+2.5-3.5mg/L?2,4-D+0.5-0.8mg/L?6-BA或者M(jìn)S+2.0-3.0mg/L?2,4-D+6.0-9.0mg/L?GA₃或者M(jìn)S+2.0-3.0mg/L?2,4-D+3.0-4.5mg/L?GA₃。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的誘導(dǎo)西洋參愈傷組織的方法，其中，對(duì)于葉片、莖段、主根、須根，誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+2.5-3.5mg/L?2,4-D+0.5-0.8mg/L?6-BA；對(duì)于種胚，誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+2.0-3.0mg/L?2,4-D+6.0-9.0mg/L?GA₃；對(duì)于西洋參無菌苗培養(yǎng)為，MS+2.0-3.0mg/L?2,4-D+3.0-4.5mg/L?GA₃；其中，西洋參無菌苗為西洋參種仁經(jīng)升汞、酒精消毒后接種于MS培養(yǎng)基，獲得的無菌苗。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的誘導(dǎo)西洋參愈傷組織的方法，其中消毒條件為，根：75％酒精10s-15s+30min?0.1-0.3％HgCl₂；葉片：75％酒精8s-12s+15min?0.1-0.3％HgCl₂；莖段：75％酒精10s-15s+25min?0.1-0.3％HgCl₂；種坯：75％酒精15s-20s+30min?0.1-0.3％HgCl₂。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的誘導(dǎo)西洋參愈傷組織的方法，還包括原料預(yù)處理步驟，選取完整植株及種胚，清水沖洗，并用0.1—0.3％的洗衣粉溶液漂洗，再流水沖洗1-3h，移至無菌室，備用消毒。

7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的誘導(dǎo)西洋參愈傷組織的方法，還包括消毒后，原料切分步驟，其中葉片沿葉脈剪成1.0cm×1.0cm左右的塊狀片段；莖段材料，選擇粗壯部分，用剪刀等器具剪除去與消毒液直接接觸的部位，然后剪成1.0cm左右的片段；主根材料，切成薄片，厚度在0.1—0.2mm；種子材料，經(jīng)預(yù)處理開口的種子可直接接種。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的誘導(dǎo)西洋參愈傷組織的方法，培養(yǎng)溫度為23-28±1℃，pH＝4.6-6.5(滅菌前)，暗培養(yǎng)。

9.一種用于誘導(dǎo)西洋參愈傷組織的培養(yǎng)的培養(yǎng)基，其特征在于含有MS+2.5-3.5mg/L2,4-D+0.5-0.8mg/L?6-BA或者M(jìn)S+2.0-3.0mg/L?2,4-D+6.0-9.0mg/L?GA₃或者M(jìn)S+2.0-3.0mg/L?2,4-D+3.0-4.5mg/L?GA₃。