[發明專利]一種誘導西洋參愈傷組織的方法

在審

• 申請號: 201510313664.8
• 申請日: 2015-06-08
• 公開（公告）號: CN104885949A
• 公開（公告）日: 2015-09-09
• 發明（設計）人: 丁之恩;孫雨薇;丁昱;任琪;徐浩;袁艷
• 申請（專利權）人: 安徽農業大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京市京大律師事務所 11321
• 代理人: 王凝;張波

1.一種誘導西洋參愈傷組織的方法，其特征在于，包含原料消毒步驟和愈傷組織誘導培養步驟，其中消毒是用0.1-0.3％HgCl₂與75％酒精組合進行消毒，其中愈傷組織誘導培養是將消毒后的原料接種于誘導培養基上，進行誘導培養。

2.根據權利要求1所述的誘導西洋參愈傷組織的方法，其中所述的原料為葉片、莖、主根、須根、種胚。

3.根據權利要求1所述的誘導西洋參愈傷組織的方法，其中誘導培養基為MS+2.5-3.5mg/L?2,4-D+0.5-0.8mg/L?6-BA或者MS+2.0-3.0mg/L?2,4-D+6.0-9.0mg/L?GA₃或者MS+2.0-3.0mg/L?2,4-D+3.0-4.5mg/L?GA₃。

4.根據權利要求2所述的誘導西洋參愈傷組織的方法，其中，對于葉片、莖段、主根、須根，誘導培養基為MS+2.5-3.5mg/L?2,4-D+0.5-0.8mg/L?6-BA；對于種胚，誘導培養基為MS+2.0-3.0mg/L?2,4-D+6.0-9.0mg/L?GA₃；對于西洋參無菌苗培養為，MS+2.0-3.0mg/L?2,4-D+3.0-4.5mg/L?GA₃；其中，西洋參無菌苗為西洋參種仁經升汞、酒精消毒后接種于MS培養基，獲得的無菌苗。

5.根據權利要求2所述的誘導西洋參愈傷組織的方法，其中消毒條件為，根：75％酒精10s-15s+30min?0.1-0.3％HgCl₂；葉片：75％酒精8s-12s+15min?0.1-0.3％HgCl₂；莖段：75％酒精10s-15s+25min?0.1-0.3％HgCl₂；種坯：75％酒精15s-20s+30min?0.1-0.3％HgCl₂。

6.根據權利要求1所述的誘導西洋參愈傷組織的方法，還包括原料預處理步驟，選取完整植株及種胚，清水沖洗，并用0.1—0.3％的洗衣粉溶液漂洗，再流水沖洗1-3h，移至無菌室，備用消毒。

7.根據權利要求2所述的誘導西洋參愈傷組織的方法，還包括消毒后，原料切分步驟，其中葉片沿葉脈剪成1.0cm×1.0cm左右的塊狀片段；莖段材料，選擇粗壯部分，用剪刀等器具剪除去與消毒液直接接觸的部位，然后剪成1.0cm左右的片段；主根材料，切成薄片，厚度在0.1—0.2mm；種子材料，經預處理開口的種子可直接接種。

8.根據權利要求1所述的誘導西洋參愈傷組織的方法，培養溫度為23-28±1℃，pH＝4.6-6.5(滅菌前)，暗培養。

9.一種用于誘導西洋參愈傷組織的培養的培養基，其特征在于含有MS+2.5-3.5mg/L2,4-D+0.5-0.8mg/L?6-BA或者MS+2.0-3.0mg/L?2,4-D+6.0-9.0mg/L?GA₃或者MS+2.0-3.0mg/L?2,4-D+3.0-4.5mg/L?GA₃。