[發(fā)明專利]油茶胚根不定芽誘導獲得再生植株的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201510310417.2 | 申請日： | 2015-06-08 |
| 公開（公告）號： | CN104823861A | 公開（公告）日： | 2015-08-12 |
| 發(fā)明（設計）人： | 譚曉風;李澤;盧錕;張琳;吳玲利;林青;袁軍;呂佳斌;石凱 | 申請（專利權(quán)）人： | 中南林業(yè)科技大學 |
| 主分類號： | A01H4/00 | 分類號： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 長沙市融智專利事務所 43114 | 代理人： | 袁靖 |
| 地址： | 410004 *** | 國省代碼： | 湖南;43 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 油茶 胚根 不定 誘導 獲得 再生 植株 方法 | ||
1.油茶胚根不定芽誘導獲得再生植株的方法，其特征在于，包括以下步驟：
1)誘導不定芽：在無菌條件下切取長為1.0-1.5cm的油茶無菌苗胚根根段，接種到1/2MS+2.0mg/L?6-BA+0.05-0.1mg/L?IAA+0.05mg/L?IBA+2.0mg/L?GA3的培養(yǎng)基中誘導不定芽；
2)繼代培養(yǎng)：將胚根誘導的不定芽切下接種到1/2MS+2.0-3.0mg/L?6-BA+0.05-0.1mg/LIBA+0-1.0mg/L?GA3的培養(yǎng)基中進行不定芽的繼代培養(yǎng)；
3)壯苗培養(yǎng)：將增殖培養(yǎng)得到的芽轉(zhuǎn)接到WPM+0.1-1.0mg/L?NAA+3.0-5.0mg/L?GA3的培養(yǎng)基中進行壯苗培養(yǎng)；
4)生根培養(yǎng)；
5)煉苗、移栽。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的油茶胚根不定芽誘導獲得再生植株的方法，其特征在于，誘導不定芽時暗培養(yǎng)3天后，再到光照條件下培養(yǎng)30-35天。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的油茶胚根不定芽誘導獲得再生植株的方法，其特征在于，繼代增殖培養(yǎng)時暗培養(yǎng)3天，再到光照條件下培養(yǎng)20-30天。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的油茶胚根不定芽誘導獲得再生植株的方法，其特征在于，壯苗培養(yǎng)時暗培養(yǎng)2天，再轉(zhuǎn)到光照條件下培養(yǎng)20-25天。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的油茶胚根不定芽誘導獲得再生植株的方法，其特征在于，將壯苗培養(yǎng)獲得3-4cm的苗接到1/2MS+1.0-2.0mg/L?IBA+1.0-2.0mg/L?NAA+35g/L珍珠巖的培養(yǎng)基中進行生根培養(yǎng)。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的油茶胚根不定芽誘導獲得再生植株的方法，其特征在于，生根培養(yǎng)時暗培養(yǎng)5天，再轉(zhuǎn)到光照下培養(yǎng)20天即可生根。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6任一項所述的油茶胚根不定芽誘導獲得再生植株的方法，其特征在于，培養(yǎng)溫度為26士1℃，光照培養(yǎng)時光照強度為2100-2200lx，光照時間12-14h/d；所述方法中用到的培養(yǎng)基均附加蔗糖30g/L，瓊脂6g/L，pH調(diào)至5.4-5.6。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的油茶胚根不定芽誘導獲得再生植株的方法，其特征在于，
胚根誘導不定芽使用的培養(yǎng)基為：1/2MS+2.0mg/L?6-BA+0.05mg/L?IAA+0.05mg/LIBA+2.0mg/L?GA3；
增殖培養(yǎng)使用的培養(yǎng)基為：1/2MS+2.0mg/L?6-BA+0.05mg/L?IBA+1.0mg/L?GA3；
壯苗培養(yǎng)使用的培養(yǎng)基為：WPM+0.5mg/L?NAA+3.0-5.0mg/L?GA3。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的油茶胚根不定芽誘導獲得再生植株的方法，其特征在于，
煉苗、移栽的具體過程如下：
將生根后的油茶試管苗先在室內(nèi)進行移栽前煉苗3-5天，然后從培養(yǎng)瓶中取出，附帶珍珠巖直接移栽到營養(yǎng)杯中，基質(zhì)為泥炭土:珍珠巖:黃土＝2:1:1，組培苗移栽后保持濕度80％以上，覆蓋薄膜并每天噴水1～2次，兩周后即逐步進行正常管理。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的油茶胚根不定芽誘導獲得再生植株的方法，其特征在于，所述的油茶無菌苗的獲得過程如下:
選取成熟的當年生油茶種子，取除種皮，將種仁用自來水沖洗3-5min，然后浸泡10-15h，中間換水2-3次，然后在超凈工作臺中先用75％的酒精浸泡20-30s，無菌水沖洗3-5次，再用0.1％的HgCl2消毒3-6min，用無菌水沖洗5-6次，切掉胚乳的大部分，把附帶胚乳的種胚接種在WPM基本培養(yǎng)基中，暗培養(yǎng)2-3天后轉(zhuǎn)到光照條件下培養(yǎng)20-25天即獲得無菌苗；培養(yǎng)溫度為26士1℃，光照強度為2100-2200lx，光照時間12-14h/d。
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