[發明專利]滑菇多糖的乙醇醇析分級制備方法

有效

• 申請號: 201510303915.4
• 申請日: 2015-06-05
• 公開（公告）號: CN105037570B
• 公開（公告）日: 2017-09-05
• 發明（設計）人: 李海平
• 申請（專利權）人: 天津商業大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 天津市三利專利商標代理有限公司12107
• 代理人: 仝林葉

技術領域

本發明屬食品領域，涉及一種滑菇(Pholiota nameko)多糖乙醇醇析分級制備的方法。

背景技術

滑菇(Pholiota nameko)，又名真珠菇、滑子蘑，擔子菌綱，散菌目，蓋球菇科，磷傘屬。滑菇因菌蓋表面有粘液而得名，滑菇口味鮮美，營養價值高，在世界上享有較高聲譽，是當今世界第五、日本第三的食用菌品種，是食用、藥用兼備的食用菌新秀。滑菇中含有對腫瘤起抑制作用的多糖物質，并可預防葡萄球菌、大腸桿菌、肺炎桿菌、結核桿菌的感染。

分級沉淀法是指在混合組分的溶液中加入能與該溶液互溶的溶劑，改變混合組分溶液中某些組分的溶解度，使其從溶液中逐步析出。當在含有溶質的水溶液中加入一定量的乙醇，從而降低溶質的溶解度，使其沉淀吸析出。具體地，當乙醇加入溶液中時，介質的介電常數降低，溶質分子之間的靜電引力增加，聚集形成沉淀。

滑菇在我國廣泛種植，但是還未見到滑菇加工產品的報道。

發明內容

本發明的目的在于提供一種滑菇多糖的乙醇醇析分級制備方法。利用水提法經酶處理所得滑菇多糖溶液是多種不同分子量的多糖的混合組分，根據以上乙醇分級沉淀原理，向滑菇多糖的水溶液中逐次加入一定體積分數的乙醇，便可以逐級沉淀出分子量由大到小的多糖，乙醇醇析得到的多糖經醋酸纖維薄膜電泳都可以達到單一條帶。

本發明的技術方案如下：

滑菇多糖的乙醇醇析分級制備，它包括以下步驟：

(1)選剔

選購新鮮滑菇，在購得的新鮮滑菇中挑選無明顯組織傷痕、大小均一且干凈的優良滑菇備用；

(2)稱重

將挑選好的優良滑菇置于提前清洗并烘干的500ml燒杯中，用電子天平稱取300g供實驗使用；

(3)浸泡

在稱取好的滑菇中加蒸餾水，滑菇與水的質量比為1:5，室溫下浸泡2h，其間每隔20min對浸泡液在速度60rpm下進行攪拌5min。

(4)破碎打漿

將浸泡過的滑菇與水一同倒入高速組織搗碎機中，對滑菇進行破碎打漿1-2min，得滑菇組織漿液。

(5)水浴浸提

將上一步所得滑菇組織漿液等分為若干份分別置于500ml燒杯中，每份適量以確保漿液恰好完全浸入水浴鍋的熱水中，再將盛有滑菇組織漿液的燒杯置于恒溫水浴鍋中，85℃下水浴浸提3h。

(6)過濾

用三層紗布對水浴過后的滑菇組織漿液進行過濾，所得若干份濾液混合留存，所得濾渣集中在一個燒杯中進行下一步。

(7)洗渣

上一步所得濾渣加1倍水于85℃下水浴浸提1h,過濾，保留濾液；所得濾渣再加0.5倍水于85℃下水浴浸提1h,過濾，棄渣，保留濾液。所得所有濾液充分混合。

(8)分級醇析

根據多糖醇析分層操作工藝流程圖1和圖2，分步按比例對“過濾”、“洗渣”兩步所得混合濾液進行醇析，具體操作如下：

①第一步

所得濾液平均分為若干份，每份150-200ml，分別置于500ml燒杯中，每份按1:1比例加無水乙醇醇析，靜置2h分三層，分別是上層絮狀多糖、中間清液以及下層膠狀多糖。取上層多糖去酒精后，棄中間清液，下層保留。上層多糖和下層多糖獲得后在4000rpm離心20min后除去液體，獲得上層多糖和下層多糖的固體。

②第二步

上一步所得下層多糖用水復溶(每g加水400ml水)，再按1:1(溶液:乙醇)比例加乙醇醇析，靜置2h，分層情況同上。取上層多糖去乙醇，棄中間清液，下層保留。

③第三步

上一步所得下層多糖用水復溶(每g加水400ml水)，再按1:1(溶液:乙醇)比例加乙醇醇析，靜置2h，分層情況同上。取上層多糖去乙醇，棄中間清液，下層保留。

④第四步

上一步所得下層多糖用水復溶(每g加水400ml水)，再按1:2(溶液:乙醇)比例加乙醇醇析，靜置2h，分層情況同上。取上層多糖去乙醇，棄中間清液，下層保留。

⑤第五步

上一步所得下層多糖用水復溶(每g加水400ml水)，再按1:3(溶液:乙醇)比例加乙醇醇析，靜置2h，分層情況同上。取上層多糖去乙醇，棄中間清液，下層保留。

⑥第六步

上一步所得下層多糖用水復溶(每g加水400ml水)，再按1:5(溶液:乙醇)比例加乙醇醇析，靜置2h分兩層，分別是上層絮狀多糖和下層清液。取上層多糖去乙醇，棄下層清液。