[發明專利]一種以腙鍵連接的納米鉆石藥物及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 201510291034.5
• 申請日: 2015-05-29
• 公開（公告）號: CN104922690A
• 公開（公告）日: 2015-09-23
• 發明（設計）人: 李林;李英奇;楊斌盛
• 申請（專利權）人: 山西大學
• 主分類號: A61K47/48
• 分類號: A61K47/48;A61K31/704;A61P35/00
• 代理公司: 山西五維專利事務所(有限公司) 14105
• 代理人: 張福增

1.一種以腙鍵連接的納米鉆石藥物的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)稱取真空干燥的羧基化納米鉆石，按每毫克羧基化納米鉆石加入1-1.5mL的濃度為0.1M、pH為5.8的MES緩沖溶液中，超聲分散30min形成懸濁液，再按每毫克羧基化納米鉆石加入0.2mg?EDC、0.25mg?NHS，室溫攪拌反應6h，反應完畢后以15000rpm高速離心5min棄除上清液，得到活化羧基的納米鉆石沉淀物；接著將活化羧基的納米鉆石沉淀物迅速分散到濃度為0.1M、pH為8.4的硼酸緩沖溶液中，經過短暫超聲分散形成懸濁液，再按每毫克活化羧基的納米鉆石快速加入0.3mg?H₂N-PEG-COOH，繼續室溫攪拌反應12h，待反應結束，以15000rpm高速離心5min吸除上清液，并用0.1M、pH?8.4的硼酸緩沖溶液高速離心洗滌三次，獲得納米鉆石-聚乙二醇ND-PEG-COOH沉淀物；

(2)稱取干燥的ND-PEG-COOH沉淀物，按每毫克ND-PEG-COOH加入1-1.5mL的濃度為0.1M、pH為5.8的MES緩沖溶液中，超聲分散30min形成懸濁液，再按每毫克ND-PEG-COOH加入0.2mg?EDC、0.25mg?NHS，室溫攪拌反應6h，反應完畢后以15000rpm高速離心5min棄除上清液，得到活化羧基的ND-PEG-COOH沉淀物；接著將活化羧基的ND-PEG-COOH迅速分散到濃度為0.1M、pH為8.4的硼酸緩沖溶液中，經過短暫超聲分散形成懸濁液，再按每毫克活化的ND-PEG-COOH快速滴加0.01mL水合肼，繼續室溫攪拌反應12h，待反應結束，以15000rpm高速離心5min吸除上清液，并用0.1M、pH?8.4的硼酸緩沖溶液高速離心洗滌三次，再用無水甲醇高速離心洗滌三次，得到納米鉆石-聚乙二醇-水合肼ND-PEG-HYD沉淀物；并置于真空干燥箱中干燥；

(3)按每毫克干燥的ND-PEG-HYD沉淀物加入2mL無水甲醇中超聲分散2h，形成懸濁液，接著按ND-PEG-HYD與阿霉素質量比為5∶1-2，將ND-PEG-HYD懸濁液逐滴滴入快速攪拌的阿霉素的甲醇溶液中，并加入0.005mL三氟乙酸與0.05mL三乙胺，通氮鼓泡30min，然后避光攪拌反應36h，待反應完畢，以15000rpm高速離心5min，并依次用pH7.2的蒸餾水、無水甲醇高速離心洗滌各五次，得到以腙鍵連接阿霉素的納米藥物ND-PEG-HYD-DOX，真空干燥，避光保存。

2.如權利要求1所述的一種以腙鍵連接的納米鉆石藥物的制備方法，其特征在于，所述的步驟(3)中ND-PEG-HYD與阿霉素的質量比為5︰1。

3.如權利要求1或2所述方法制備得到的以腙鍵連接的納米鉆石藥物。

4.如權利要求3所述的以腙鍵連接的納米鉆石藥物在制備抗腫瘤藥物中的應用。