[發明專利]一種利用UPLC?Q?TOF/MS技術快速測定寡聚古羅糖醛酸的方法

有效

• 申請號: 201510280987.1
• 申請日: 2015-05-28
• 公開（公告）號: CN104897835B
• 公開（公告）日: 2017-07-07
• 發明（設計）人: 張爽;陶冠軍;秦昉;陳潔
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/60;G01N30/72;G01N30/34
• 代理公司: 無錫市大為專利商標事務所(普通合伙)32104
• 代理人: 時旭丹,劉品超

1.一種利用UPLC-Q-TOF/MS技術快速測定寡聚古羅糖醛酸的方法，其特征在于步驟為：

（1）標準品的準備：準備古羅糖醛酸單糖G1、古羅糖醛酸二糖G2、古羅糖醛酸三糖G3、古羅糖醛酸四糖G4；

（2）樣品前處理：將含寡聚古羅糖醛酸樣品以超純水溶解，配成濃度為0.1g/mL溶液，過0.22μm濾膜后待測；

（3）色譜條件：色譜柱 ACQUITY UPLC CSH C18 Column，2.1 mm×100 mm，1.7μm，流動相為乙腈A相和0.1%甲酸B相，梯度洗脫程序：0-1 min，2% A+98 %B；1-15min，2 %A+98%B～60%A+40%B；15-17 min，60%A+40%B～100 %A，流速0.3mL/min，柱溫：45℃，進樣量 1μL；

（4）質譜條件：質譜儀WATERS MALDI SYNAPT-Q-TOF/MS，電噴霧離子源，負離子掃描模式，離子源溫度100℃，脫溶劑溫度400℃，脫溶劑氣流量700L/h，錐孔氣流量50 L/h，掃描范圍50-2000Da，一級質譜錐孔電壓30 V，裂解能量6eV，掃描時間1s；

（5）寡聚古羅糖醛酸定性定量方法的建立：采用外標法定量；將4種標準品G1-G4配成等質量濃度的混合標準儲備液，并用乙腈-水溶液逐級稀釋使4種寡聚古羅糖醛酸含量均分別為15、30、50、75、100、125、150mg/L，以每個濃度下每種寡聚古羅糖醛酸對應的母離子提取離子色譜圖中的積分峰面積為縱坐標，混合標準溶液的濃度為橫坐標，建立標準曲線；

G1-G4分別對應的母離子依次為：G1選擇m/z 193、G2選擇m/z 369、G3選擇m/z 545、G4選擇m/z 721；檢測樣品時，根據樣品在同一保留時間處對應的母離子提取離子積分峰面積值，根據標準曲線方程，獲得對應寡聚古羅糖醛酸的含量。