[發明專利]一株重組大腸桿菌的構建及其合成(S)-2-羥基-3-苯基丙酸的方法在審
| 申請號： | 201510279435.9 | 申請日： | 2015-05-27 |
| 公開（公告）號： | CN104878024A | 公開（公告）日： | 2015-09-02 |
| 發明（設計）人： | 朱益波;王立梅;齊斌;王穎;梁劍光 | 申請（專利權）人： | 常熟理工學院 |
| 主分類號： | C12N15/53 | 分類號： | C12N15/53;C12N15/70;C12N1/21;C12P7/42;C12R1/19 |
| 代理公司： | 江蘇致邦律師事務所 32230 | 代理人： | 徐蓓 |
| 地址： | 215500 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 重組 大腸桿菌 構建 及其 合成 羥基 苯基 丙酸 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種L-乳酸脫氫酶基因，其核苷酸序列如SEQ?ID?NO：1所示。
2.攜帶權利要求1所述的L-乳酸脫氫酶基因的重組表達質粒pET-28a-ldhL。
3.含有權利要求2所述的載體的重組大腸桿菌。
4.權利要求3所述的重組大腸桿菌的構建方法，該方法包括以下步驟：?
（1）根據大腸桿菌的密碼子偏好性對巨大芽孢桿菌（Bacillus?megaterium?Z2013513）CCTCC?NO：M2013244?L-乳酸脫氫酶基因進行密碼子優化；
（2）將密碼子優化的L-乳酸脫氫酶基因導入pET-28a(+)載體得到重組表達載體pET-28a-ldhL；
（3）將得到的重組表達載體pET-28a-ldhL轉化E.?coli?BL21(DE3)后得到重組大腸桿菌。
5.權利要求3所述的重組大腸桿菌在轉化苯丙酮酸合成(S)-2-羥基-3-苯基丙酸中的應用。
6.權利要求3所述的重組大腸桿菌轉化苯丙酮酸合成(S)-2-羥基-3-苯基丙酸的方法，該方法包括以下步驟：
（1）全細胞菌懸液制備，將重組大腸桿菌單菌落接種至種子培養基中活化，再將此種子液接種至擴大培養基中培養至對數中期，添加產酶誘導劑IPTG，低溫誘導并收集菌體以獲得全細胞菌懸液；
（2）流加底物苯丙酮酸和葡萄糖，全細胞生物轉化合成(S)-2-羥基-3-苯基丙酸。
下載完整專利技術內容需要扣除積分，VIP會員可以免費下載。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于常熟理工學院，未經常熟理工學院許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201510279435.9/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
- 上一篇：大寬幅數控裁剪機
- 下一篇：一種白坯簾子布經紗疵點檢測裝置
